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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>>Kovac試劑

          Kovac試劑

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-24 13:19:47瀏覽次數(shù):270

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml|500ml
          貨號 GOY-01X10133 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          Kovac試劑公司*的產(chǎn)品:KLRF1/NKp80/FITC 熒光標記性受體NK-p80抗體IgG偏硅鈉,五水 95%
          K-ras/FITC 熒光標記原癌因K-ras抗體IgG零水偏硅鈉 SiO2, 44-47%
          KT3 tag/FITC 熒光標記KT3 tag標簽抗體IgG偏硅鈉,九水 AR
          KT3 tag/HRP 辣根過氧化物標記KT3 tag標簽抗體IgG偏硅鈉,九水 CP

          詳細介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:Kovac試劑

          英文名稱:

          產(chǎn)品規(guī)格:100ml|500ml

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          用途:

          又稱柯氏試劑或吲哚試劑,用于吲哚實驗。

          注意事項:

          陽性呈紅色,即形成玫瑰吲哚,屬于一種顯色反應(yīng)試劑,主要成分為對二甲等。

          儲存條件:室溫,避光,12個月

          細胞生物學研究有以下幾個方面:

          細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細胞核、染色體以及基因表達的研究;

          ②生物膜與細胞器的研究;

          ③細胞骨架體系的研究;

          ④細胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細胞的起源與進化;

          ⑧細胞工程.

          實驗報告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

          2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

          5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二基(洛沙坦雜質(zhì))英文名稱: 1-BromopyreneT淋巴凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g

          2,2-二基-4-異基-1,3-并二茂英文名稱: 4-Bromopyrene蛋白調(diào)解因子9抗體包裝25g

          2,3,4-三-O-酰-泊酚-β-D-葡萄糖苷...英文名稱: 1,6-Diaminopyrene胰腺激抗體包裝5g

          2,3-去亞異基托吡酯英文名稱: 1,3-Diaminopyrene纖溶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g

          2,3-脫氫鈉鹽英文名稱: 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合α/β/γ抗體包裝5g

          2,4-二(三基硅烷基)-5-尿嘧啶英文名稱: 1-Nitropyrene含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g

          2,4-二基-6-基-7-蝶啶英文名稱: 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g

          2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)基...英文名稱: 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg

          2-[(2,6-二)基]英文名稱: 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體包裝1g

          2-(巰基)腺苷 5'-三磷四鈉鹽合物英文名稱: 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg

          2-基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格...英文名稱: 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g

          2-基-6,8-二羥基嘌呤鹽鹽英文名稱: 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g

          2-基-6-羥基-8-巰基嘌呤英文名稱: 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g

          2-基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷合物英文名稱: 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g

          2-基腺苷英文名稱: 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g

          乳酪棒桿菌Corynebacterium│casei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷脫羧65試劑盒木糖;純品型;標準品;有證書

          總狀毛霉Mucor│racemosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷脫羧試劑盒果糖成分分析標準物質(zhì)

          鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品谷受體試劑盒糖精鈉;純品型;標準品;有證書
          Kovac試劑短桿狀馬賽 1,3,5-三(4-溴苯基)苯膜結(jié)合型前列腺E合成1Elisa

          西奈青霉 4-(三氟甲基)環(huán)己酮磷酸化P38蛋白Elisa

          抗輻射鏈霉 順式環(huán)己-1,2-二甲酰亞磷酸化c-jun氨基末端蛋白激Elisa

          哈茨木霉 4-羥基-2,6-二甲酸RNA聚合轉(zhuǎn)錄終止因子ⅠElisa

          松鼠葡萄球松鼠亞種 2-溴肉桂酸維甲酸Elisa

          紅色紅曲霉 3--2-甲酸Ca-Mg-ATPElisa

          根瘤 4--2-甲酸黃體生成受體Elisa

          大豆慢生根瘤 2-萘乙白介17DElisa

          黑腐皮殼 L-精氨酸硝酸鹽基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白Elisa

          中華根瘤 6--5-氮雜Ⅰ型膠原C端肽β特殊序列Elisa

          解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 三(三氟磺酸)鋁鈣調(diào)Elisa

          竹喙球 2--1,1,1-氧基乙烷α酮戊二酸Elisa

          猴頭菇 8-溴甲基喹啉雌酮Elisa

          鏈格孢 3-甲三鹽脫氫表雄酮硫酸酯Elisa

          釀酒酵母 丁酰乳酸丁酯聚(ADP核糖)聚合1Elisa 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

          2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

           


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