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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介紹：
細胞周期(cell cycle)是指細胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為止的活動過程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期組成。G1 期：細胞開始RNA和蛋白質(zhì)的合成，但DNA含量仍保持二倍體。S 期：DNA 開始合成，這時細胞核內(nèi)DNA的含量介于G1 期和G2 期之間。當DNA 復制結(jié)束成為4倍體時，細胞進入G2 期。G2 期的細胞繼續(xù)合成RNA及蛋白質(zhì)，直到進入M 期。因此，單純從DNA含量無法區(qū)分G2 期和M 期。一旦有絲分裂發(fā)生，細胞分裂成兩個細胞，這兩個細胞或者進入下一個細胞周期，或者進入靜止期(G0期)，而G0 期從DNA含量上同樣無法與G1 期區(qū)分。因此，整個復制周期可以描述為G0/G1、S、G2/M 期。通過核酸染料PI標記DNA,并由流式細胞儀進行分析，可以得到細胞各個時期的分布狀態(tài)，計算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在腫瘤病理學研究中，通常以S 期細胞比率作為判斷腫瘤增殖狀態(tài)的指標。 PI 為插入性核酸熒光染料，能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA 雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合，其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系，用流式細胞儀進行分析，就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態(tài)，從而計算出各個期的百分含量。PI染色后，假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M 期細胞的熒光強度的理論值為2，正在進行DNA 復制的S 期細胞的熒光強度為1-2 之間。 細胞周期檢測試劑盒是利用細胞內(nèi)DNA 能夠和熒光染料結(jié)合的特性，細胞各個時期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同，流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣來檢測細胞周期。 儲存條件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
布林佐(標準品)英文名稱： Axitinib胱抗體包裝5g
布洛芬（標準品）英文名稱： Azaperone胰凝乳蛋白B抗體包裝1g
布美他尼;丁氧（標準品）英文名稱： Azasetron HCl補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體包裝5g
草（標準品）英文名稱： Azelastine base 分化促進因子77抗體包裝25g
草依地普侖/草（標準品）英文名稱： Bacitracin Zinc 半胱蛋白抑制劑樣蛋白1抗體包裝5g
茶海明（標準品）英文名稱： Benazepril HydrochlorideCTBS蛋白抗體包裝25g
蟾它靈(標準品)英文名稱： Benazepril Hydrochloride硫軟骨β1/β-1,4-GalNAc-T抗體包裝5g
蟾酥；華蟾酥基；華蟾精（標準品）英文名稱： Bezafibrate硫軟骨聚合3抗體包裝25g
長春（標準品）英文名稱： Bezafibrate胎盤催乳1/2抗體包裝5g
長春（標準品）英文名稱： Blonanserin酪激C-SRC抗體包裝25g
長春質(zhì)堿(標準品)英文名稱： Brivudine磷化酪激C-SRC抗體包裝5g
朝藿定B（標準品）英文名稱： Brivudine酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體包裝1g
赤蘚紅（標準品）英文名稱： Cabazitaxel半胱延伸蛋白α抗體包裝1g
醋己鋅（標準品）英文名稱： Mitoxantrone磺基轉(zhuǎn)移CSPS抗體包裝100g
醋谷/乙酰谷酰（標準品）英文名稱： Lamotrigine富含半胱蛋白2抗體包裝25g
猴頭菇99Hericium erinaceus 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)血管緊張1-7試劑盒胸腺五肽;Thymopentin
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品血管活性腸肽試劑盒細辛脂;(-)-asarinin
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR血管動蛋白試劑盒仙鶴草酚B;agrimol B
細胞周期檢測試劑盒類干酪乳桿 Alvelestat腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Elisa
新瀉氨基桿 Enalaprilat Dihydrate蛋白激CεElisa
蠟狀芽孢桿 Bitopertin谷轉(zhuǎn)氨Elisa
NCI-H1563（人胚肺） AT7519琥珀酸；丁二酸Elisa
公牛鏈霉 Canagliflozin病性出血病病抗體Elisa
釀酒酵母 R406 (free base)連環(huán)蛋白βElisa
島生異擔子 Ostarine蓋他病抗體Elisa
抑制暗棕色桿 Nafamostat Mesylate可溶性補體激活產(chǎn)物SC5b9Elisa
Sphingomonas Moexipril HCl賴氫酸吡啶啉Elisa
根瘤 2-甲氧基-6-羧酸甲酯吡水痘帶狀皰疹病IgG抗體Elisa
灰平鏈霉 2,4,5,6-四氟間苯二甲核仁磷酸蛋白Elisa
貝萊斯芽胞桿 Ozagrel鋅原卟啉Elisa
腸膜明串珠 4-溴-2,6-二酚金屬硫蛋白Elisa
Microbacterium flavum 2-甲基肉桂酸相關(guān)蛋白A-IgG抗體Elisa
食砜節(jié)桿 異啉鹽酸鹽H7N9Elisa
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