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商品介紹:
測(cè)定意義
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,與糖異生途徑、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),在機(jī)體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
測(cè)定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無(wú)機(jī)磷和NAD,340nm處測(cè)定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。
需自備的儀器和用品
分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:操作時(shí)間短,48-50T,可測(cè)40例樣本左右,96-100T,可測(cè)80例樣本左右; 2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè),部分試劑盒取樣多少請(qǐng); 3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效; 4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好; 5、回收試驗(yàn): X =99%; 6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng); 7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測(cè)植物,歡迎咨詢。 |
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒DMEM(High,without Sodium Pyruvate)紅 85%(-)-表沒(méi)食子兒茶素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒DMEM(High,without Sodium Pyruvate,含雙抗)紅 96%表兒茶素沒(méi)食子酯 98%
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒DMEM(Low)紅 99%羊藿定 A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒DMEM(Low,含雙抗)莧菜紅 85%羊藿定 B 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒MEM莧菜紅 分析標(biāo)準(zhǔn)品羊藿定 C 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
小鼠尿素氮(BUN)聯(lián)免疫試劑盒Ham's F12 莧菜紅標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mg/ml,溶劑:水表告依春 98%
小鼠尿素氮(BUN)聯(lián)免疫試劑盒DMEM/F12叔丁對(duì)苯二酚 98%圣草次苷 ≥98.0% (HPLC), 分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠氨氨轉(zhuǎn)移(ALT)聯(lián)免疫試劑盒M199叔丁對(duì)苯二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)圣草次苷 ≥98.0% (HPLC)
小鼠氨氨轉(zhuǎn)移(ALT)聯(lián)免疫試劑盒ACK紅裂解液(ACK Lysis Buffer)新胭脂紅 85%甘草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%
小鼠Toll樣受體4(TLR4)ELLSA試劑盒ACK紅裂解液(ACK Lysis Buffer)亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5mg/ml,溶劑:水甘草 93%
小鼠Toll樣受體4(TLR4)ELLSA試劑盒Gey's紅裂解液(Gey's Lysis Buffer)亮藍(lán) 85%牡荊素葡萄糖苷 98%
小鼠新生狀腺素elisa試劑盒Gey's紅裂解液(Gey's Lysis Buffer)藻紅B Biological stainL-4-羥異亮氨 98%
小鼠新生狀腺素elisa試劑盒紅裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)藻紅B 96%異綠原C 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
小鼠血管緊張素Ⅰelisa試劑盒紅裂解液(RBC Lysis Buffer,10×)四熒光素鈉鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品異綠原A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
小鼠血管緊張素Ⅰelisa試劑盒紅洗滌液(pH7.2)四熒光素鈉鹽 85%α-倒捻子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
大鼠一氧化氮(NO)試劑盒Tris-化銨紅裂解液四熒光素鈉鹽 95%羥積雪草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)紫外分光光度法猴Ⅰ型膠原α2(COL1α2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 N-Boc-D-苯氨鏈霉菌屬拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
猴組織因子途徑抑制因子2(TFPI2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒N-Boc-D-苯氨長(zhǎng)枝木霉拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
猴氨氨肽(AAP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鹽坦索羅辛植物乳桿菌植物亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴前動(dòng)力蛋白受體2(PKR2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鹽坦索羅辛美澳型核果褐腐病菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
猴核孔蛋白50kda(NUP50)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒乙鉻短小芽孢桿菌拉丁屬名: Vagococcus sp.
猴抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 三硅Vagococcus sp.用途: 植物病原物;用于該類群菌的系統(tǒng)學(xué)研究
猴抑制蛋白β2(ARRβ2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒三硅楊樹(shù)細(xì)盾霉拉丁屬名: Pseudomonas japonica
猴精氨(Arg)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 三硅假單胞菌拉丁屬名: Dictyophora sp.
猴τ-蛋白激1(τPK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Boc-Gly-OH-15N竹蓀屬用途: 鞘翅目天牛屬害蟲(chóng)生物防治
猴生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒二乙酰[(S)-(-)-2,2'-雙(二-P-苯磷酰)-1,1'聯(lián)萘]釕球孢白僵菌拉丁屬名: Fomitopsis pinicola
猴八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子1(OBTF1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒二乙酰[(S)-(-)-2,2'-雙(二-P-苯磷酰)-1,1'聯(lián)萘]釕松生擬層孔菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 阿達(dá)帕林香菇7拉丁屬名: Penicillium simplicissimum
猴凝血(TM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Olprinone簡(jiǎn)青霉拉丁屬名: Comamonas terrigena
猴胎盤核糖核抑制劑(PRI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 膦二乙酯土生叢毛單胞菌拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes
猴雌激素受體β(ERβ)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 膦二乙酯暗產(chǎn)色鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
猴鳥(niǎo)苷環(huán)化激活因子2B(GUCA2B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 膦二乙酯扁菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用