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          CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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          更新時(shí)間:2022-04-21 11:26:57瀏覽次數(shù):271

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          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500T
          貨號(hào) GOY-01X9590 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司*的產(chǎn)品:CD31/PECAM-1 血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體甜蜜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品
          CD33/Siglec-3 CD33抗體苯氧鈉 98%
          CD33/Siglec-3 CD33抗體苯酚鈉 90%
          CD33L/OBBP1 CD33L抗體無水碳鈉 99.9999% metals basis
          CD34 CD34抗體化亞錫 SP
          CD34 CD34抗體化亞

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          此試劑盒是用于測(cè)定細(xì)胞增殖或毒性試驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度,無放射性的比色檢測(cè)法。實(shí)驗(yàn)的靈敏度比其它如MTT, XTT 或MTS 高。由于新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液相當(dāng)穩(wěn)定,并且對(duì)細(xì)胞沒有毒性,可直接加入到細(xì)胞樣品中長時(shí)間孵育。

          操作方法

          1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4. 向各孔中加入10 μl 的新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液。

          5. 37℃下孵育1~4 小時(shí)。

          6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度。

          結(jié)果分析

          1. 細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加新型細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)溶液,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

          英文名稱:英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格:500T

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

          CD30分子(CD30)英文名稱:CD30 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝1g

          CD19分子(CD19)英文名稱:CD19 ELISA KitB轉(zhuǎn)錄激活因子抗體包裝250mg

          CC趨化因子受體6(CCR-6)英文名稱:CCR-6 ELISA KitBCL6B抗體包裝5g

          cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)英文名稱:CREB ELISA KitBAP31蛋白抗體包裝1g

          Ca-ATP(Ca-ATPase)英文名稱:Ca-ATPase ELISA Kit支鏈基轉(zhuǎn)2抗體包裝1g

          B因子(BF)英文名稱:BF ELISA KitBCL2相關(guān)蛋白A1抗體包裝250mg

          B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)英文名稱:Bcl-2 ELISA KitB淋巴瘤蛋白3抗體包裝5g

          B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)英文名稱:Bcl-xl ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體包裝1g

          B細(xì)胞活化因子(BAFF)英文名稱:BAFF ELISA Kit防御β1/Defensin β1抗體包裝25g

          BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)英文名稱:Bid ELISA KitB活化因子受體抗體包裝5g

          Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)英文名稱:BAX ELISA KitTNF家族B激活因子抗體包裝1g

          Apelin 13(AP13)英文名稱:AP13 ELISA Kit蛇巴曲抗體包裝5g

          apelin 12(AP12)英文名稱:AP12 ELISA Kit大腦蛋白2抗體包裝100g

          Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)英文名稱:Col Ⅳ ELISA Kit程序性死亡配體1抗體包裝25g

          Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)英文名稱:PⅢP ELISA KitB7-H4抗體包裝1g

          糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)抗體促狀腺胚胎因子(TEF)MDM2 antagonist nutlin-3 is a potent inducer of apoptosis.
          CCK-8法細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒微小毛霉 5-溴吡啶-3-(N-乙基)甲酰磷酸化IκB激酶-α檢測(cè)試劑盒

          Rhizobium  multihospitium 3,4-二氯芐磷酸化N-甲基-D-天冬氨酸檢測(cè)試劑盒

          Pseudomonas eucalypticola 3,5-二氯-2,4,6-三氟吡啶磷酸化α-氨基羥甲基惡唑酸檢測(cè)試劑盒

          樹舌1-2 2,5-二溴對(duì)苯二甲酸二乙酯磷酸化表皮生長因子受體檢測(cè)試劑盒

          短小芽孢桿 6-三氟甲基-2-氧化磷酸化肌球蛋白輕鏈檢測(cè)試劑盒

          短小芽孢桿 4-氟-2-甲氧基苯酸磷酸化神經(jīng)絲H檢測(cè)試劑盒

          多形環(huán)紋炭團(tuán) 3-氯-2,4,5,6-四氟吡啶磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶檢測(cè)試劑盒

          友好戈登氏 ,6-二溴-4-氟苯磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶檢測(cè)試劑盒

          瑞士乳桿 三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)鐠(Ⅲ)[核磁共振位移試劑]磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶檢測(cè)試劑盒

          麥芽糖假絲酵母 十二碳二酸二甲酯磷酸化信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1檢測(cè)試劑盒

          粗糙脈孢 6-乙酸基-7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮磷酸化信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3檢測(cè)試劑盒

          德夸素鏈霉 二十二烷基基氯化銨磷酸肌酸激酶檢測(cè)試劑盒

          禾谷絲核 6-羥基-7-甲氧基喹唑啉-4-酮磷酸烯式酮酸羧激酶檢測(cè)試劑盒

          兩型蠟蚧 2,3-二甲酯磷脂檢測(cè)試劑盒

          葡萄牙棒孢酵母 4-溴-2,6-二氟甲苯磷脂肌3激酶檢測(cè)試劑盒 

           


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