詳細介紹
商品介紹:
用途: 用于血小板計數(shù) 注意事項: 由草酸銨等組成。 儲存條件:室溫,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
血竭高鹽(標準品)英文名稱: L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗體包裝10MG
鴉膽子(標準品)英文名稱: Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激底物相關蛋白抗體包裝5MG
鴉膽子苦(標準品)英文名稱: L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗體包裝1g
鴉膽子D(標準品)英文名稱: L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝抗體包裝250mg
鴨腳樹葉堿(標準品)英文名稱: L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗體包裝5g
鴨跖草(標準品)英文名稱: L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
亞硫氫鈉穿心蓮內(nèi)酯(標準品)英文名稱: L-Serine methyl ester hydrochloride蛭抗體包裝25g
亞麻木酚(標準品)英文名稱: L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副腫瘤綜合癥小腦變性相關蛋白抗體包裝5g
煙堿(標準品)英文名稱: L-Tyrosine methyl ester 植物熱休克蛋白93抗體包裝25g
延胡索(元胡)(標準品)英文名稱: L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重組人瘤病抗體包裝5g
延胡索(標準品)英文名稱: H-Phe-OEt.HCl長鏈烯脂酰脫氫抗體包裝25g
延胡索乙;消旋延胡索乙(標準品)英文名稱: Glycine ethyl ester hydrochloride羥脫氫β抗體包裝5g
延齡草苷;地索苷(標準品)英文名稱: L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羥基三基裂解抗體包裝1g
芫花(標準品)英文名稱: L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗體包裝250mg
芫花條(標準品)英文名稱: L-Aspartic acid β-benzyl ester磷化三羥基三基還原抗體包裝1g
硬結節(jié)桿菌Arthrobacter│scleromae 質(zhì)量規(guī)格:>98%輪狀病試劑盒柯伊利-7-O-葡萄糖苷;Chryso
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,叔丁鹽形式輪狀病試劑盒柯諾辛B;Corynoxine B
橙黃色粘球菌Myxococcus│xanthus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP卵清蛋白特異性IgG試劑盒柯諾辛;Corynoxine
血小板稀釋液(計數(shù)液)青色糖單孢 3-氨基-2-萘甲酸二烯氧化物合Elisa
暗色節(jié)菱孢* 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸酮酸激Elisa
豇豆慢生根瘤 羥鈷鹽酸鹽査爾酮合Elisa
橙色桿狀 維生B1超氧化物歧化Elisa
印度毛殼 磺異惡唑赤霉Elisa
草木樨中華根瘤 磺異惡唑赤霉3Elisa
牧草紅酵母 2-氨基-4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩-3-羧酸單脫氫抗壞血酸還原Elisa
枯草芽孢桿 3,4,5-三氟膽色原脫氨Elisa
光滑青霉 3-(氯磺酰)-2-噻吩羧酸甲酯淀粉Elisa
土曲霉原變種 3-氯噻吩-2-羧酸獨腳金內(nèi)酯Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-硝苯多氧化Elisa
耶爾森氏屬 2-羥基-5-多酚氧化Elisa
腸道致病性大腸埃希氏 5-羧酸尿嘧啶多聚半乳糖酸Elisa
亞羅酵母屬 氨酸丁酯二磷酸核酮糖羧化Elisa
金黃色葡萄球 氨酸丁酯二酰基甘油Elisa