詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:3×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 乙肝病毒/HBV染色 注意事項(xiàng): 特異性高,但染色效果易受原料影響,不穩(wěn)定。HBsAg陽性物質(zhì)呈棕紅至深棕色,背景呈淺淡灰棕色肝細(xì)胞核不著色。肝細(xì)胞內(nèi)脂褐素也呈深棕色。 儲存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
10-去乙酰巴卡丁III英文名稱: 2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione腺苷環(huán)化激活肽-27/38抗體包裝1g
10-氧多烯紫杉英文名稱: 9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedionep19ARF抑癌基因抗體包裝5g
13-O-(三乙基硅基)巴卡丁III英文名稱: 9-Bromophenanthrenep21蛋白抗體包裝100g
13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-BromophenanthreneP2Y1受體抗體/嘌呤受體抗體包裝25g
13-{[(3-N-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3,6-Dimethylphenanthrene神經(jīng)再生相關(guān)蛋白抗體包裝1g
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-Methylphenanthrene絲裂原活化蛋白激p38α抗體包裝5g
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 3-Bromo-1,10-phenanthroline促尿鈉排泄肽前體C抗體包裝10mg
13-{[(3-t-Boc)-2,2-二基-4S-...英文名稱: 5-Chloro-1,10-phenanthroline磷脂磷2C抗體包裝50mg
13-順式-酯視黃英文名稱: 2-Chloro-1,10-phenanthroline配對盒基因1抗體包裝5g
13-乙基-17-羥基-18,19-dinor-17α...英文名稱: 4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline配對盒基因2抗體包裝250mg
13-乙基-18,19-二去基-17α-pregn-...英文名稱: 5,6-Dimethyl-1,10-phenanthrolinep21激活激2抗體包裝1g
14-柔紅霉英文名稱: 2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline磷酯Cβ3抗體包裝5g
15-基前列異酯英文名稱: 2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝1g
15-基拉坦前列(游離)英文名稱: 2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline磷化星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝25g
15β-羥基醋環(huán)孕英文名稱: 3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline廣譜角蛋白PCK抗體包裝5g
金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移6抗體試劑盒D-麥芽糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒D型Clostridium│perfringens Type D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移2抗體試劑盒檸檬;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
海神弧菌Vibrio│neptunius 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品谷酰轉(zhuǎn)移2抗體試劑盒L-亮;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
乙型肝炎病毒染色液(Shikata地衣紅法)聚紅粉端孢霉 6-噠3-羧酸乙酯Flag標(biāo)簽Elisa
紅色蠟?zāi)?/span> 甲基膦酸二甲酯腺病抗體Elisa
香港洛克氏 三溴鼠痘病抗體Elisa
白僵 N-甲基二環(huán)己基肺炎病抗體Elisa
長蠕孢 磷酸氟達(dá)拉濱呼腸孤病III型抗體Elisa
對溴苯酸甲酯脈絡(luò)叢腦膜炎病IgG抗體Elisa
Aquimonas 4-甲基吡唑流行性出血熱病抗體Elisa
Microbacterium marinilacus D-(+)-蘋果酸二乙酯過氧化物Elisa
變異鏈霉 5-氨基-1,2,4-噻二唑完整的成纖維生長因子23Elisa
干草鞘氨單胞 5--2-苯甲成纖維生長因子23的C端裂解片段Elisa
蠟狀芽孢桿 2-溴-5-苯甲去乙?;疭irtuin-6Elisa
枯草芽胞桿 雙(3-氨基-4-羥苯基)砜球蛋白G2bElisa
產(chǎn)堿普羅威登斯 2-氨基-5-溴-3-芐氧基吡啶球蛋白G3Elisa
假單胞 7-氮雜-5-羧酸組織因子Elisa
鹽假單胞 2-(3-1H-吡唑基)吡啶抗抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)