商品介紹:
Leukadherin-1是一種特異性的CR3和白細(xì)胞表面整合素CD11b/CD18的激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):344897-95-6 純度:98.0% 分子量:421.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
巨大芽胞桿菌血小板活化因子CTR9抗體Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA Kit人游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒
炭彎曲嗜菌前列環(huán)合成抗體Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA Kit人游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA Kit人游離蛋白S(FP-S)免疫試劑盒
根瘤菌T淋巴CD1A抗體Human SSC5D(Soluble scavenger receptor cysteine-rich domain-containing protein SSC5D) ELISA Kit人游離雌三(FE3)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌磷化周期B1抗體Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人游離β絨毛膜促性腺激(f-βhCG)免疫試劑盒
水黏結(jié)桿菌胞漿型磷脂A2抗體Human Foxj1(Forkhead box protein J1) ELISA Kit人幽門螺旋菌抗體(IgA)免疫試劑盒
灰略紅鏈霉菌膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體Human IS(serum indoxyl sulfate) ELISA Kit人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢緊密連接蛋白6抗體Human HOXB7(Homeobox protein Hox-B7) ELISA Kit人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化緊密連接蛋白6抗體Human HSPBAP1(HSPB1-associated protein 1) ELISA Kit人硬骨(SOST)免疫試劑盒
藤倉赤霉著絲粒蛋白T抗體Human IL-17RA(Interleukin 17 receptor A) ELISA Kit人印度猬因子(IHH) 免疫試劑盒
嗜麥芽黃單胞菌染色體相關(guān)蛋白2抗體Human HDAC6(Histone deacetylase 6) ELISA Kit人隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母著絲粒蛋白P抗體Human ABCA13(ATP Binding Cassette Transporter A13) ELISA Kit人吲哚2,3-雙加氧(IDO)免疫試劑盒
大腸桿菌分裂周期相關(guān)蛋白5抗體Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA Kit人吲哚(INDO)自身抗體免疫試劑盒
黑曲霉染色體相關(guān)蛋白2抗體Human CD19(Cluster of Differentiation 19)人音猬因子N端(Shh-N)免疫試劑盒
無氧芽孢桿菌周期調(diào)控因子10抗體Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA Kit人音猬因子(SHH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌中心體蛋白97kDa抗體Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA Kit人抑制β-B(Inhbb)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRIgγ3鏈C區(qū)試劑盒7-O-基白楊
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRICOS配體試劑盒巨大戟
多殺性巴氏桿菌Pasteurella│multocida 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRICE蛋白激活因子試劑盒25-氧基-原人參三
CD11b/CD18激動(dòng)劑(Leukadherin-1)依諾肝鈉英文名稱: Tin (II) oxalate蛋白酪磷H1抗體包裝25g
依曲替酯;阿維酯英文名稱: Tin (IV) oxide磷化磷脂酰肌激催化亞單位D抗體包裝5g
依曲韋林英文名稱: Titanium (III) sulfate磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體包裝1g
依替膦鈉英文名稱: Titanium (IV) sulfate穿孔抗體包裝250mg
*度英文名稱: Tributyl citratePALM3抗體包裝100g
*英文名稱: Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution芳香酯1(對(duì)氧磷)抗體包裝25g
乙嘧啶英文名稱: Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas磷吡哆氧化抗體包裝100g
乙昔羅鈉英文名稱: Tryptamine磷化蛋白激C抗體包裝25g
異丁司特英文名稱: Tungsten (VI) oxide磷化蛋白激C抗體包裝500g
吲達(dá)帕英文名稱: Tungsten carbide-200磷化腫瘤抑制基因PTEN抗體包裝1g
吲哚美辛英文名稱: Tungsten powder磷化磷脂酰肌激催化亞單位A抗體包裝250mg
右旋蘭索拉唑英文名稱: Tungstic (VI) acid磷化磷脂酰肌激抗體包裝100g
右旋洛芬英文名稱: Verruculogen from Penicillium verruculosum磷化磷脂酰肌激抗體包裝25g
右旋洛芬丁三英文名稱: Wool fat磷化蛋白激C抗體包裝5g
右佐匹克英文名稱: X-GLUC, sodium salt磷化蛋白激C抗體包裝25g