XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑公司*的產(chǎn)品：CD24 CD24抗體(R)-1-氨-8-(二苯膦)-1,2,3,4 -四氫 97%
CD25/IL-2RA 白介素2受體a鏈抗體海藻鈉 生化級(jí)，用于固定、酶等
CD122/IL-2RB 白介素2受體β鏈抗體天狼星玫紅，BB AR
CD26 CD26抗體亞鈉，五水 AR
IL-2R gamma/CD132 白介素2受體γ鏈抗體7B 95

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑

英文名稱：XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit

產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

III型前膠原基末端肽(PⅢNP)英文名稱：PⅢNP ELISA KitBcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）包裝100g

G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)英文名稱：GPBAR1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體包裝25g

GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)英文名稱：GATA4 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體包裝1g

FMS樣酪激3配體(Flt3L)英文名稱：Flt3L ELISA KitBcl-2樣蛋白2抗體包裝250mg

FMS樣酪激3(Flt3)英文名稱：Flt3 ELISA Kit殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體包裝5g

FAM84A蛋白(FAM84A)英文名稱：FAM84A ELISA KitBcl-2抗體包裝25g

FAM172A蛋白(FAM172A)英文名稱：FAM172A ELISA Kit腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體包裝5g

E選擇(E-Selectin/CD62E)英文名稱：E-Selectin/CD62E ELISA Kit膽鹽激活脂肪抗體包裝1mg

E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)英文名稱：E-Cad ELISA Kit3-羥丁脫氫抗體包裝25g

E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)英文名稱：TRIM68 ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪酰基解抗體包裝5g

D-乳脫氫(D-LDH)英文名稱：D-LDH ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝10mg

D二聚體(D2D)英文名稱：D2D ELISA Kit磷化β分泌抗體包裝50mg

DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)英文名稱：DNMT3B ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝1g

DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)英文名稱：DNMT3A ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝25g

DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)英文名稱：DNMT1 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5g

芳香乙酰脫乙酰基樣蛋白2抗體肝核因子1β(HNF1β)LCL161 is an orally bioavailable second mitochondrial-derived activator of caspa
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑ATCC 10211 氧基硅醌氧化還原酶1檢測(cè)試劑盒

斜頂 4-二基丁縮二甲賴氨酰氧化酶檢測(cè)試劑盒

相思根瘤 2-(基硅基)噻吩酪氨酸蛋白激酶檢測(cè)試劑盒

聚貪氏 3,5-二叔丁基水楊酸酪氨酸蛋白激酶受體A2檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 對(duì)甲草酸二酯酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體檢測(cè)試劑盒

Nocardioides 4-乙氧基-1-萘甲酸酪氨酸激酶檢測(cè)試劑盒

非脫羧勒克 N-叔丁氧羰基-5-溴酪氨酸激酶2檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 2,8-二甲基-2,3,4,5-四氫-1H-吡啶并[4,3-b]酪氨酸激酶受體檢測(cè)試劑盒

球孢白僵 6-羥基吡啶-2-羧酸酪氨酸酶檢測(cè)試劑盒

赭色擲孢酵母 9,9-二辛基芴-2,7-雙(酸頻哪酯)酪氨酸羥化酶檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母 N-環(huán)戊基甘氨酸甲酯鹽酸鹽酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1檢測(cè)試劑盒

美澳型核果褐腐病 鄰芐氧苯酪酪肽；多肽YY檢測(cè)試劑盒

耶納農(nóng)球 4,6-二甲基-2-庚酮雷帕霉素靶蛋白檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 3,4-二羥基噻吩-2,5-二羧酸二乙酯類白抗原C檢測(cè)試劑盒

Bacillus tequilensis  4-氯-3-甲基吡啶鹽酸鹽

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)