詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:磷脂染色液(酸性蘇木紅法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 磷脂染色 注意事項: 磷脂、神經(jīng)髓鞘磷脂和核蛋白呈藍黑色,胞質(zhì)呈灰黃色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
酯封端右旋聚乳(重均分子量102-137萬)英文名稱: Indobufen寡腺苷合成-1包裝10MG
酯封端右旋聚乳(重均分子量137-170萬)英文名稱: Triprolidine hydrochlorideKLHDC9蛋白抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量17-26萬)英文名稱: Milrinone少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量170-206萬)英文名稱: Azelaic acid螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體包裝1g
酯封端右旋聚乳(重均分子量206-288萬)英文名稱: Perindoprilat小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量26-36萬)英文名稱: Potassium Sorbate緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體包裝1g
酯封端右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬)英文名稱: Betahistine mesylate富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK3抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量36-48萬)英文名稱: Glucurolactone癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量48-73萬)英文名稱: transplatin 少突髓磷脂糖蛋白抗體包裝5g
酯封端右旋聚乳(重均分子量5.5-9萬)英文名稱: Oxalic acid阿片樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/粘附分子樣蛋白抗體包裝100g
酯封端右旋聚乳(重均分子量73-102萬)英文名稱: Oxiconazole Nitrate外致密纖維尾部蛋白4抗體包裝25g
酯封端右旋聚乳(重均分子量9-17萬)英文名稱: Pregabalin2'-5'-寡腺苷合成2抗體包裝100g
酯封端左旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬)英文名稱: [(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity)µ-型阿片受體抗體包裝25g
酯封端左旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)英文名稱: D-Sorbitol磷化D型阿片受體抗體包裝5g
酯封端左旋聚乳(重均分子量102-137萬)英文名稱: Ethylene Glycol含氧轉(zhuǎn)移1抗體包裝25g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%基質(zhì)γ羧基谷蛋白試劑盒補骨脂;Coryfolin
棲糖蜜棒桿菌Corynebacterium│melasscola 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白試劑盒扁蓄苷;avicularin
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP試劑盒表木栓;Friedelan-3beta
磷脂染色液(酸性蘇木紅法)橙色單胞 1,1-環(huán)烷二甲果糖Elisa
糞產(chǎn)堿桿* 2-環(huán)己基-2-羥基硫化氫Elisa
旱生紅曲霉 4-乙氧羰基苯酸抗肽LL-37Elisa
空腸彎曲桿 2,2,2-三氟乙基對甲苯磺酸酯血管緊張IIElisa
熒光假單胞桿 6-(5--2-吡啶基)-5H-吡咯并[3,4-b]吡-5,7(6H)-二酮過氧化物Elisa
大腸埃希 支原體Elisa
金針菇—金白1號 4,6-二-5-硝基嘧啶泰澤病原體Elisa
Actinomadura amylolytica 1,1-二溴-3,3,3-三氟酮弓形蟲Elisa
糙皮側(cè)耳 2-酰噻唑呼腸弧病3Elisa
小麥蒼白桿 叔丁氧羰基氨氧基乙酸肝炎病Elisa
栗疫 1-丁基-2-甲基肺炎病Elisa
腐生葡萄球 4--6-甲氧基喹啉鼠痘病Elisa
豇豆慢生根瘤 2-溴-4甲基芐細小病Elisa
大腸埃希氏 1-庚烷蛋白質(zhì)羰基Elisa
耶爾森氏 3,4-噻吩二羧酸8-異構(gòu)前列腺Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)