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          PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒

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          • PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-21 13:38:47瀏覽次數(shù):275

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500T
          貨號(hào) GOY-01X9717 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:IKB alpha 核因子κB抑制蛋白α抗體3-溴 98%
          phospho-IKK alpha (Thr23) 化KB抑制蛋白激α抗體3-溴 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析
          phospho-IKK alpha (Tyr463) 化KB抑制蛋白激α抗體環(huán)溴 98%
          phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 化KB

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          熒光染料PKH26 是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料,可以標(biāo)記活體細(xì)胞,通過(guò)與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞。對(duì)細(xì)胞毒性較小,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細(xì)胞膜,有著強(qiáng)而穩(wěn)定的紅色熒光。

          在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,PKH26的熒光強(qiáng)度會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而逐級(jí)遞減,標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,因此其熒光強(qiáng)度是親代細(xì)胞的一半,根據(jù)這一特性,它可被用于檢測(cè)細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期的估算及細(xì)胞分裂等方面。PKH26標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中,PKH26標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過(guò)流式細(xì)胞儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強(qiáng)度),二次(1/4的熒光強(qiáng)度),三次(1/8的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。PKH26可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)六次甚至更多。經(jīng)PKH26標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。

          PKH26標(biāo)記的細(xì)胞用于體內(nèi)觀察可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周之久,它常被用來(lái)做活體細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和用熒光電鏡觀察細(xì)胞長(zhǎng)期活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)。PKH26 毒性較小,不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡(jiǎn)單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患??梢愿焖?,更準(zhǔn)確和更安全地得到想要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

          PKH26標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)。

          PKH26標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,熒光波長(zhǎng):λex=551 nm,λem=567 nm。

          儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。

          有效期:一年。

          以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          發(fā)貨周期

          PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒


          500T

          1~3天


          操作步驟:

          1. 樣品染色

          1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。

          2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

          3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

          4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

          5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

          2. 樣品檢測(cè)

          1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

          染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

          建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

          2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

          染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
          公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

          二.細(xì)胞處理:

          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxifloxacin Hydrochloride7號(hào)染色體開放閱讀框25抗體包裝1g

          阿扎那韋硫鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxifloxacin HydrochlorideCOG1蛋白抗體包裝25g

          艾地醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salmeterol xinafoate過(guò)敏C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體包裝5g

          愛(ài)普列特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NaproxenCD3抗體包裝1g

          安倍生坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NaproxenCP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝5g

          安乃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體包裝1g

          (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prednisone煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體包裝5g

          蝶啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxycycline monohydrate/Doxycycline baseC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體包裝25g

          (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zoledronic acid hydrateγ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體包裝5g

          芐西林/芐青霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zoledronic acid hydrate血小板因子4抗體包裝1g

          芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pamidronate Disodium血小板趨化因子7蛋白抗體包裝250mg

          丁三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pamidronate Disodium干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體包裝5g

          芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gentamicin sulfate B-淋巴趨化因子抗體包裝100g

          基比林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gentamicin sulfate 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝25g

          基己(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefuroxime Sodium 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體包裝5g

          黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR血管生長(zhǎng)試劑盒α-香附;α-Cyperone

          ATCC15173=CCUG407=CIP7715=DSM30026=ICPB4221=IFO15125=JCM5490=LMG1231=NCTC8582=AS1.1800資源名稱: 木糖氧化產(chǎn)堿菌反硝化亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮抑抗體試劑盒異烏藥內(nèi)酯;linderalactone

          南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%血管內(nèi)皮粘附分子1試劑盒新藤黃;neogambogic aci
          PKH26細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒霍氏腸桿 L-天冬氨酸-4-芐酯糖脂抗體Elisa

          尖孢鐮刀 五氯吡啶胞裂蛋白9Elisa

          釀酒酵母 5-溴-2-氯牛痘病IgMElisa

          哈茨木霉 衣康酸酐唾液睪酮Elisa

          綠色木霉 4-甲氧基-2-氧代-1,2-二氫-3-基吡啶D-絲氨酸Elisa

          球孢白僵 1,10-二氯癸烷趨化因子20Elisa

          金灰青霉 2-氯-5-羥甲基吡啶趨化因子28Elisa

          毛木耳 2,3,4-三羥基苯甲空泡相關(guān)蛋白A抗體Elisa

          金龜子綠僵 5-氯-2-羥基-3-硝基吡啶腦膜炎奈瑟氏Elisa

          死亡谷芽孢桿 2',3'-O-異叉肌苷髓過(guò)氧化物Elisa

          傳染性法氏囊病病 鄰氯三氯甲苯卡介苗抗體Elisa

          慢生根瘤 草酸鈮(V)酪氨酸Elisa

          堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 2-乙氧基苯酸過(guò)氧化氫Elisa

          雞傷寒沙門氏 3-氯-2-氟苯β氨基己糖苷AElisa

          嗜果刀孢 4-溴-2-氟類缺陷病Elisa

           


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