商品介紹:
用途: 抗酸菌(結(jié)核桿菌等)染色,可鑒別抗酸菌與非抗酸菌 注意事項(xiàng): 熒光顯微鏡下抗酸菌呈亮黃色,非抗酸桿菌和背景呈暗黃色。主要由金胺O染色液、脫色液、復(fù)染液組成。 儲存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:抗酸染色液(金胺O熒光法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鹽伊托必利英文名稱: Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides蛋白磷2Cα抗體包裝25g
鹽依普拉英文名稱: Sulfamethazine sodium salt磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝5g
鹽乙哌立松英文名稱: Sulfobromophthalein disodium salt hydrate神經(jīng)胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5)包裝1g
鹽異英文名稱: Sulfo-MBS磷化蛋白激Aβ抗體包裝25g
鹽異腎上腺(進(jìn)口)英文名稱: Tetraheptylammonium bromide蛋白激A受體2α亞基抗體包裝5g
鹽異腎上腺(國產(chǎn))英文名稱: Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution磷化蛋白激A受體2α亞基抗體包裝1g
鹽右美托咪定英文名稱: Thapsigargin, from Thapsia garganica蛋白激Aγ抗體包裝5g
鹽左西替利英文名稱: Thioflavin T蛋白激受體相關(guān)1β抗體包裝1g
鹽左旋咪唑英文名稱: Thiolutin from Streptomyces luteosporeusB淋巴誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體包裝250mg
葉綠銅鈉鹽英文名稱: Thionin磷化酪磷α抗體包裝5g
伊班膦鈉英文名稱: Thiosalicylic acid蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體包裝100g
伊潘立英文名稱: Thiostrepton from Streptomyces azureus磷化酪磷α抗體包裝25g
伊屈潑帕;艾曲波帕英文名稱: ThorinPDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體包裝500g
伊索拉定英文名稱: Thymine磷脂磷解1抗體包裝5g
依達(dá)拉奉英文名稱: Timentin抑癌基因p16/p14/P19抗體包裝1g
伊拉克固氮螺菌Azospirillum irakense 質(zhì)量規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉純度>99.95% 胱天蛋白9試劑盒蘆丁(+)-三合蕓香苷-對照品;有報(bào)告
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白8試劑盒靛藍(lán);有報(bào)告-對照品;有報(bào)告
霍氏腸桿菌Enterobacter│hormaechei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白-5試劑盒沒食子-對照品;有報(bào)告
抗酸染色液(金胺O熒光法)枯草芽孢桿 2-羥基-3-溴-6-磷酸化α;β水解域包含蛋白5Elisa
釀酒酵母 2--3-氟-6-磷酸化圍脂滴蛋白Elisa
立枯絲核 2-溴-6-甲基-3-硝基吡啶堿性磷酸Elisa
韓國靈芝 Boc-DL-氨酸乙酰酯Elisa
玫瑰栗色鏈霉 四甲基氟化銨谷氨酸脫羧Elisa
側(cè)耳屬 3-(甲基磺?;?苯基酸γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨Elisa
桿狀毛霉 3-羥基-4,4,4-三氟丁酸乙酯補(bǔ)體因子DElisa
囊軸發(fā)仙囊軸亞種 喹啉-4-酸磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
微核鏈霉 3,4,5-三羧酸苯二酸單酰Elisa
須芒草伯克霍爾德氏 7-羥基庚酸腎Elisa
樣品粉碎機(jī) (-)-二甲基-2,3-鄰異亞基-L-酯周期依賴性激抑制因子1AElisa
產(chǎn)紫青霉 甘氨酰-L-氨酸色P4503A4Elisa
大腸埃希 2-溴-4-羥基吡啶補(bǔ)體片段Elisa
蘑菇 3-硝基鄰苯二卵清蛋白IgG1抗體Elisa
Burkholderia anthina 1-氧雜螺[2.5]辛烷-2-甲卵清蛋白IgG2a抗體Elisa