以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
蘇丹Ⅳ染色液-A液 |
| 100ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 脂肪染色,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著。 注意事項(xiàng): 主要由蘇丹四號(hào)、乙醇等組成。 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
紫草(新疆紫草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cetylpyridinium chloride軸突導(dǎo)向因子1抗體包裝25g
紫草呋喃A英文名稱: Hydroxychloroquine sulfate酪激B抗體包裝5g
紫草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Asperuloside跨膜受體蛋白Notch-3抗體包裝5g
紫草茸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TOK-001中性粒彈性蛋白ELANE抗體包裝1g
紫草,左旋紫草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside型肝炎病NS4B(65kDa)抗體包裝25g
紫草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pentoxifylline神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
紫丁香酚苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clebopride死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體包裝5mg
紫河車(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Buddlejasaponin Ivb神經(jīng)絲蛋白抗體包裝100g
紫花地?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Erdosteine磷化核因子抗體包裝25g
紫花杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pimecrolimus跨膜受體蛋白Notch-1抗體包裝100g
紫花前胡苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Torasemide磷化核受體Rev-Erbα抗體包裝25g
紫花前胡苷元英文名稱: Naftopidil dihydrochloride雞新城疫病抗體包裝500mg
紫花前胡英文名稱: Naftopidil dihydrochloride還原型輔Ⅱ/磷酰腺嘌呤二核苷抗體包裝250ml
紫金蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IrbesartanNIT2蛋白抗體包裝100ml
紫金龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tegaserod maleate神經(jīng)分化因子1抗體包裝500ml
鐮霉菌Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品幾丁質(zhì)1試劑盒;Benzaldehyde
腐霉Pythium│ultimum 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%集蛋白亞家族成員11試劑盒白頭翁皂苷A;Pulchinenosid
尖鐮孢Fusarium│oxysporum 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP34低密度脂蛋白試劑盒扁桃;Mandelic acid
蘇丹Ⅳ染色液-A液枯草芽胞桿 2-氨基十六烷酸環(huán)磷酸腺苷Elisa
多毛孢 3,5-二溴三氟甲苯磷脂Elisa
豇豆慢生根瘤 2,3-二苯甲酰干擾誘導(dǎo)蛋白1Elisa
香菇(L087) 3-溴三氟甲苯白三烯Elisa
Marisediminicola 2-溴-5-氟三氟甲苯顆粒蛋白前體Elisa
蘇云金芽孢桿松蠋亞種 3-溴-2-酚白介38Elisa
產(chǎn)酸克雷伯氏 溴乙酯巨噬炎性蛋白Elisa
玉蜀黍赤霉 2-甲基巰基-4-氨基嘧啶-5-甲酸乙酯甘油一酯Elisa
螺卷毛殼(只確定屬) 3-基-1,2-抗甲狀腺過氧化物抗體Elisa
松口蘑 芴甲氧羰基-L-高精氨酸膽酸Elisa
谷氨酸棒桿 2-氨基-1,3,4-噻二唑短鏈脂肪酸Elisa
秦氏蜜環(huán) 2-溴-1,4-二氟苯Klotho蛋白Elisa
枯草芽孢桿 4-氨基苯甲脒鹽酸鹽3β羥基類固脫氫Elisa
黑曲霉 2'-氟乙酰苯17β羥基類固脫氫Elisa
栗酒裂殖酵母 磷酸氫二P450側(cè)鏈裂解Elisa