以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MAPKAPK2(MK2)激酶抑制劑 | MK2-IN-1 hydrochloride | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
MK2-IN-1鹽酸鹽是MAPKAPK2(MK2)激酶高效選擇性抑制劑,IC50值0.11uM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1314118-94-9 別名:MK2 Inhibitor 純度:99.79% 分子量:509.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌6號染色體開放閱讀框199抗體Human WNT2(Protein Wnt-2) ELISA Kit人抗EB病抗體(EBV)免疫試劑盒
總狀毛霉7號染色體開放閱讀框34抗體Human WWC1(Protein KIBRA) ELISA Kit人抗E3泛蛋白連接TRIM21(TRIM21)抗體免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌6號染色體開放閱讀框201抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人抗DNAB抗體(anti-DNase B Ab)免疫試劑盒
鏈球菌屬6號染色體開放閱讀框203抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)免疫試劑盒
微白螺孢菌6號染色體開放閱讀框204抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人抗BB抗體(BB-Ab)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢6號染色體開放閱讀框206抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)免疫試劑盒
黑曲霉6號染色體開放閱讀框211抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)免疫試劑盒
煙曲霉6號染色體開放閱讀框225抗體Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) ELISA Kit人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)免疫試劑盒
乳桿菌屬6號染色體開放閱讀框25抗體Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒
側(cè)耳6號染色體開放閱讀框35抗體Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit人卷曲蛋白8(FZD8)免疫試劑盒
戴爾根霉6號染色體開放閱讀框52抗體Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit人聚集蛋白(Agrin)免疫試劑盒
第三梭菌6號染色體開放閱讀框57抗體Human MAP1LC3B(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B) ELISA Kit人巨噬移動抑制因子(MIF)免疫試劑盒
棒曲霉6號染色體開放閱讀框58抗體Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白5(MIP-5)免疫試劑盒
毛木耳6號染色體開放閱讀框62抗體Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌6號染色體開放閱讀框70抗體Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌6號染色體開放閱讀框72抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:AR1,4,5-三磷肌試劑盒雞屎藤苷酯
草菇Volvariella│volvacea 質(zhì)量規(guī)格:IND1,3-二磷甘油試劑盒雞屎藤苷
擬盤多毛孢Pestalotiopsis│sp. 質(zhì)量規(guī)格:IND1,25二羥基維生D3試劑盒雞屎藤苷
MAPKAPK2(MK2)激酶抑制劑球蛋白A(IgA)檢測試劑盒英文名稱:IgA ELISA Kit磷化促腎上腺皮質(zhì)ACTH抗體包裝25mg
輪狀病毒(RV)抗原(Ag)檢測試劑盒英文名稱:Ag ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g
卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)檢測試劑盒英文名稱:OVA sIgG ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g
卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)檢測試劑盒英文名稱:OVA sIgE ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g
卵泡抑(FS)檢測試劑盒英文名稱:FS ELISA Kit磷化內(nèi)收蛋白a1抗體包裝25g
硫氧化還原蛋白(Trx)檢測試劑盒英文名稱:Trx ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g
硫氧還蛋白還原(TrxR)檢測試劑盒英文名稱:TrxR ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝250mg
磷脂酰絲(PS)檢測試劑盒英文名稱:PS ELISA Kit性神經(jīng)酰1抗體包裝1g
磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)檢測試劑盒英文名稱:PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit粘附調(diào)節(jié)分子1抗體包裝1g
磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC-3)檢測試劑盒英文名稱:GPC-3 ELISA Kit氣味結(jié)合蛋白抗體包裝5g
磷脂D2(PLD2)檢測試劑盒英文名稱:PLD2 ELISA Kit乙脫氫2抗體包裝1g
磷脂A2(PL-A2)檢測試劑盒英文名稱:PL-A2 ELISA Kit膜粘連蛋白10抗體包裝1g
磷脂肌3激(PI3-K)檢測試劑盒英文名稱:PI3-K ELISA Kit前梯度同源蛋白2抗體包裝250mg
磷腺苷(cAMP)檢測試劑盒英文名稱:cAMP ELISA Kit乙脫氫5抗體包裝100g
磷烯式羧激(PCK)檢測試劑盒英文名稱:PCK ELISA Kit通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體包裝25g