以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
HPGDS inhibitor1是造血前列腺素D合成酶(HPGDS)抑制劑,IC50為0.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1033836-12-2 純度:99.49% 分子量:381.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
圈卷產(chǎn)色鏈霉菌淺色變種磷化酪激C-SRC抗體Human TMEM126A(Transmembrane protein 126A) ELISA Kit人抗補(bǔ)體1q抗體(anti-C1q-antibody)免疫試劑盒
pGFP4412酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體Human ENHO(Adropin) ELISA Kit人抗型肝炎病抗體(anti-HCV)免疫試劑盒
球色單隔孢屬半胱延伸蛋白α抗體Human TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) ELISA Kit人抗酰tRNA合成,線粒體(AARS2)抗體免疫試劑盒
釀酒酵母磺基轉(zhuǎn)移CSPS抗體Human DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) ELISA Kit人抗酰tRNA合成,質(zhì)(AARS)抗體免疫試劑盒
富含半胱蛋白2抗體Human TBC1D1(TBC1 domain family member 1) ELISA Kit人抗表皮基底膜抗體(EBMZ)免疫試劑盒
*灰葡萄孢軟骨性蛋白1抗體Human TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) ELISA Kit人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)免疫試劑盒
假單胞菌富含半胱蛋白結(jié)合蛋白抗體Human THAP4(THAP domain-containing protein 4) ELISA Kit人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗體 免疫試劑盒
釀酒酵母CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體Human MBOAT4(Ghrelin O-acyltransferase) ELISA Kit人抗白蛋白抗體(AAA)免疫試劑盒
龜裂鏈霉菌軟骨相關(guān)蛋白CRTAP抗體Human LRP5(Low-density lipoprotein receptor-related protein 5) ELISA Kit人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgM)免疫試劑盒
金黃桿菌屬1號(hào)染色體開放閱讀框100抗體Human ATP13A2(Probable cation-transporting ATPase 13A2) ELISA Kit人抗β2糖蛋白I(β2-GPI)抗體(IgG)免疫試劑盒
產(chǎn)棒桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框104抗體Human TMEM132D(Transmembrane protein 132D) ELISA Kit人抗α干擾抗體(IFNα-Ab)免疫試劑盒
堀越氏芽孢桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框112抗體Human MSMB(Beta-microseminoprotein) ELISA Kit人抗α-胞襯蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母1號(hào)染色體開放閱讀框113抗體Human RSAD2(Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗UACA抗體(IgG)免疫試劑盒
薄層桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框114抗體Human DNAJC27(DnaJ homolog subfamily C member 27) ELISA Kit人抗U1小核核糖核蛋白70kDa(SNRNP70)抗體免疫試劑盒
產(chǎn)棒桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框109抗體Human SIK2(Serine/threonine-protein kinase SIK2) ELISA Kit人抗TNF-α自身抗體免疫試劑盒
狂犬病病CD93抗體Human SORBS1(Sorbin and SH3 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗SS-B/La抗體免疫試劑盒
: ivcas7.00089資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:AR12-脂氧化/脂加氧試劑盒薯蕷皂苷元-3-O-β-D-木糖-(1→
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:AR12羥二十烷四烯試劑盒3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-
雞縱菌Macrolepiota│albuminosa (Berk.) Pegler 質(zhì)量規(guī)格:AR11-脫氧皮質(zhì)ELISA Kit澤瀉A
HPGDS抑制劑(HPGDS inhibitor 1)尿激型纖溶原激活物(uPA)檢測(cè)試劑盒英文名稱:uPA ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體包裝5g
內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)檢測(cè)試劑盒英文名稱:visfatin ELISA Kit胎蛋白抗體包裝1g
內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑(vaspin)檢測(cè)試劑盒英文名稱:vaspin ELISA Kit擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體包裝5g
內(nèi)皮脂肪(EL)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EL ELISA KitATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5MG
內(nèi)皮型一氧化氮合3(eNOS-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:eNOS-3 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體包裝100ml
內(nèi)皮型一氧化氮合(eNOS)檢測(cè)試劑盒英文名稱:eNOS ELISA Kit性鈣調(diào)蛋白3抗體包裝10MG
內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:eNOS-3 ELISA Kit磷化CD156b抗體包裝1g
內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)檢測(cè)試劑盒英文名稱:eNOS ELISA Kit乙脫氫5抗體包裝25g
內(nèi)皮1(ET-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ET-1 ELISA Kit乙脫氫6抗體包裝5g
腺來源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EG-VEGF ELISA Kit溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移5抗體包裝1g
內(nèi)(ET)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ET ELISA Kit遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體包裝5g
腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BDNF ELISA Kit調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體包裝250mg
腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BDNF ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝200mg
腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BNP ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝5g
腦紅蛋白(NGB)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NGB ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g