商品介紹:
GW274150是一種新型的NADPH依賴性的iNOS抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):210354-22-6 純度:99.84% 分子量:219.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
iNOS抑制劑(GW274150) | GW274150 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Paucimonas lemoignei4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體Human KCNA4(Potassium voltage-gated channel subfamily A member 4) ELISA Kit人孕激誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體Human Protein NDRG3(N-myc downstream-regulated gene 3 protein) ELISA Kit人孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體Human P311(Neuronal protein 3.1) ELISA Kit人鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgM)免疫試劑盒
嗜熱鏈球菌CD226抗體Human TIGAR(TP53-Inducible Glycolysis and Apoptosis Regulator) ELISA Kit人鑰孔蟲(chóng)戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌屬CD26抗體Human anti-CarP(anti-carbamylated protein) ELISA Kit人遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1(FUBP1)免疫試劑盒
桃色枝頂孢免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體Human ApoB48 ELISA Kit人原纖維蛋白-1(FBN1)免疫試劑盒
腸桿菌屬緊密連接蛋白20抗體Human ABHD1 ELISA Kit人原鈣黏1(PCDH1)免疫試劑盒
游動(dòng)球菌屬中心體蛋白135抗體Human EMP3(Epithelial membrane protein 3) ELISA Kit人魚(yú)精蛋白1(PRM1)免疫試劑盒
膠孢半胱蛋白蛋白-7抗體Human ABL2 ELISA Kit人誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
Herbaspirillum canariense鈣調(diào)節(jié)抗體(鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào))Human ABT1 ELISA Kit人有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)免疫試劑盒
檸檬假絲酵母1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框181抗體Human ABLIM1 ELISA Kit人游離脂肪(FFA)免疫試劑盒
*杏葉斑鏈格孢Ⅰ型補(bǔ)體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)Human ACADSB ELISA Kit人游離原卟啉(FEP)免疫試劑盒
青霉屬8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體Human ABTB1 ELISA Kit人游離血紅蛋白(f-Hb)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體Human ACADVL ELISA Kit人游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒
石面單胞菌色P450 2C9抗體Human ACBD3 ELISA Kit人游離肉堿免疫試劑盒
摩洛哥芽孢桿菌色P450 2D6抗體Human ACAP1 ELISA Kit人游離前列腺特異性抗原(fPSA)免疫試劑盒
教酒鏈霉菌Streptomyces│chartreusis 質(zhì)量規(guī)格:>70%,BSKI-67抗原試劑盒桔梗皂苷元
煙草Colletotrichum│tabacum 質(zhì)量規(guī)格:BR;溶液,Au在23.5-23.8%Jo1抗體/抗組酰tRNA合成抗體試劑盒焦袂康
: AS01資源名稱: 熱帶假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BRIV形膠原蛋白α3鏈試劑盒基當(dāng)藥寧
iNOS抑制劑(GW274150)鹽伊托必利英文名稱: Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides蛋白磷2Cα抗體包裝25g
鹽依普拉英文名稱: Sulfamethazine sodium salt磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝5g
鹽乙立松英文名稱: Sulfobromophthalein disodium salt hydrate神經(jīng)胞漿蛋白9.5抗體(蛋白基因產(chǎn)物9.5)包裝1g
鹽異英文名稱: Sulfo-MBS磷化蛋白激Aβ抗體包裝25g
鹽異腎上腺(進(jìn)口)英文名稱: Tetraheptylammonium bromide蛋白激A受體2α亞基抗體包裝5g
鹽異腎上腺(國(guó)產(chǎn))英文名稱: Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution磷化蛋白激A受體2α亞基抗體包裝1g
鹽右美托咪定英文名稱: Thapsigargin, from Thapsia garganica蛋白激Aγ抗體包裝5g
鹽左西替利英文名稱: Thioflavin T蛋白激受體相關(guān)1β抗體包裝1g
鹽咪唑英文名稱: Thiolutin from Streptomyces luteosporeusB誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體包裝250mg
葉綠銅鈉鹽英文名稱: Thionin磷化酪磷α抗體包裝5g
伊班膦鈉英文名稱: Thiosalicylic acid蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體包裝100g
伊潘立英文名稱: Thiostrepton from Streptomyces azureus磷化酪磷α抗體包裝25g
伊屈潑帕;艾曲波帕英文名稱: ThorinPDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體包裝500g
伊索拉定英文名稱: Thymine磷脂磷解1抗體包裝5g
依達(dá)拉奉英文名稱: Timentin抑癌基因p16/p14/P19抗體包裝1g