詳細介紹
商品介紹:
用途: 紅色溶液,常用于脂肪染色,可用于油脂是否存在的檢驗 注意事項: 主要由蘇丹Ⅲ、乙醇組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
芝麻林(標準品)英文名稱: 2-Methyl-5-nitroimidazoleNADPH oxidase 3抗體包裝5g
芝麻(標準品)英文名稱: Dihydralazine sulphateNADPH氧化NOX家族的成員4抗體包裝5g
知母(標準品)英文名稱: Amitriptyline HCl 分裂周期相關蛋白1抗體包裝1g
知母皂苷A1英文名稱: IPRATROPIUM BROMIDENFAM1抗體包裝5g
知母皂苷A3(標準品)英文名稱: DL-Lysine Acetylsalicylate環(huán)指蛋白67抗體包裝100ml
知母皂苷BII(標準品)英文名稱: Guaifenesin神經(jīng)母瘤抑瘤蛋白1抗體包裝25ml
知母皂苷E(標準品)英文名稱: Cloperastine hydrochloride嗜中性粒胞漿因子1抗體包裝5ml
梔子(標準品)英文名稱: Mannitol;D-Mannitol線粒體復合物NDUFS3蛋白抗體包裝1g
蜘蛛香(標準品)英文名稱: Mannitol;D-Mannitol雄激受體復合物相關蛋白/核受體相互作用蛋白抗體包裝5g
植(標準品)英文名稱: Elacridar;GF120918;GW09189號染色體開放閱讀框156抗體包裝1g
止瀉木子(標準品)英文名稱: Venlaine hydrochloride核因子活化T胞漿蛋白3抗體包裝25g
枳殼(標準品)英文名稱: Venlaine hydrochloride干轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8抗體包裝5g
枳實(橙)(標準品)英文名稱: Protoporphyrin IX神經(jīng)凋亡抑制蛋白抗體包裝1g
制何首烏(標準品)英文名稱: Ropivacaine mesylate樣蛋白2抗體包裝25g
腫節(jié)風(草珊瑚)(標準品)英文名稱: Ropivacaine mesylateSNF1/AMP激相關激2抗體包裝5g
LMG3301=NCTC12171=CIP105838資源名稱: 中間蒼白桿菌 質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定基化CpG結合蛋白2試劑盒白皮杉;Piceatannol
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade脊髓灰質(zhì)炎病抗原試劑盒白蠟樹精;Fraxinol
AS2.368資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品脊髓灰質(zhì)炎病試劑盒白花前胡E;Praeruptorin
蘇丹Ⅲ酒精飽和溶液灰黃青霉 2,6-二-叔-丁基-4-乙基磷酸Elisa
胎兒別樣希瓦氏 4--7-甲基吡咯并[2,3-D]嘧啶磷酸化肌球蛋白輕鏈Elisa
釀酒酵母 三唑鈉肌球蛋白輕鏈激Elisa
干酪乳桿 肉桂酸異酯貓杯狀抗體Elisa
黃褐曲霉 N-苯基可溶性淀粉前體蛋白βElisa
梭 4-乙酰氨基-5--2-甲氧基酯神經(jīng)生長導向因子Elisa
褐球固氮 庚酸異丁酯3-硝基酪氨酸Elisa
根瘤 3-氨基-4-甲酯鈣離子Elisa
頂孢霉 1-溴-5-氟戊烷前列腺特異性抗原Elisa
釀酒酵母 異戊酸異龍腦酯嗜鉻粒蛋白AElisa
寡養(yǎng)單胞屬 2-氟-6-Toll樣受體9Elisa
柯奈尼亞小單孢 庚酸酯G_(i;o)蛋白Elisa
炭疽芽孢桿 5-溴-3-氟吡啶前列腺特異性抗原Elisa
溶血不動桿基因型4 肉桂酸正酯結核IgG抗體Elisa
灰腐質(zhì)霉 3,4-二氟苯肼鹽酸鹽結核IgM抗體Elisa