商品介紹:
WST-1 是廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。WST-1 是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT 類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。 首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan 不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan 都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產(chǎn)生的formazan 比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan 更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS 更加穩(wěn)定,使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高??梢杂糜诩?xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測,或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制檢測等。WST-1 使用時無須同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外步驟去溶解formazan。WST-1對細(xì)胞無明顯毒性。加入WST-1 顯色后,可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到佳測定時間。 儲存條件:2-8℃避光保存。 注意: 1.WST-1短期存放于2-8℃,長期存放請分裝后-20℃避光保存。 2.避免反復(fù)凍融。 3.凍存后溶解時注意重新混勻。 有效期:一年。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:250T|500T|1000T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Drospirenone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tigecycline整合αM/巨噬表面分子抗體包裝10g
Dutasteride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tigecycline血小板內(nèi)皮黏附分子-1抗體包裝50g
Epinephrine hydrochloride(標(biāo)...英文名稱: Tilmicosin血小板內(nèi)皮黏附分子1抗體包裝1g
Estradiol Benzoate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TilmicosinCD34抗體包裝25MG
Estradiol Cypionate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timolol MaleateCD36抗體包裝100ml
Estradiol Enanthate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Timolol Maleate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝25ml
Estradiol Valeate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體包裝5g
Estriol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tinidazole凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝25g
Estrone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Base4號染色體開放閱讀框34抗體包裝5g
Ethiny Estradiol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Base酪蛋白激1γ3/CKI γ3抗體包裝25g
Ethisterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Sulfate凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝5g
Etoposide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tobramycin Sulfate膽固氧化抗體包裝250mg
Fasudil hydrochloride(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tolnaftate半胱蛋白蛋白14抗體包裝1g
Fenofibrate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Topotecan HCl半胱蛋白蛋白5抗體包裝5g
Fenofibric acid(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Topotecan HCl豬瘟病抗體包裝1g
: Z332資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR血栓A2試劑盒g(shù)薟精;Darutigenol
曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血栓前體蛋白試劑盒β-細(xì)辛腦;β-Asarone
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0% ,合物血清淀粉樣蛋白P試劑盒a-細(xì)辛;a-Asarone
WST-1細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒土庫曼鹽土生古 7-溴-1-氯異喹啉半胱氨酸蛋白3Elisa
皺孢鏈霉 4-嗎啉基芐S轉(zhuǎn)移π1Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 2-乙?;?5-溴吡啶S轉(zhuǎn)移π1Elisa
釀酒酵母 3--4-硝基茴香蛋白激RElisa
發(fā)酵乳桿 2-氯-4-甲可溶性EPO受體Elisa
德沃斯氏 3-氯-4-甲肝臟甘油三脂脂肪Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-氟苯磺酰結(jié)核分枝桿Elisa
產(chǎn)色鏈霉 3-基-4-氟苯酸膜聯(lián)蛋白-A3Elisa
大腸埃希氏桿 3-氨基-2-甲基酸水合物1-羥基芘Elisa
解淀粉芽孢桿 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯乙酰肝硫酸鹽Elisa
小鏈霉 氯酞酸血管內(nèi)皮生長因子抗體Elisa
米根霉 2-(十八氧基)乙梅螺旋體IgM抗體Elisa
大腸埃希 2-氨基-3-基-4,5-二甲基吡咯梅螺旋體Igg抗體Elisa
芽孢桿 氯酞酸信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa
草色串孢 2-(十八氧基)乙磷酸化信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5Elisa