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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 16:01:45瀏覽次數(shù)：621
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 200μl |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9873 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：200μl
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
細(xì)胞膜熒光染料CM-DiI 是一種新型細(xì)胞膜染料，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞，適合監(jiān)測細(xì)胞運(yùn)動(dòng)以及細(xì)胞定位分析。因具有良好的染料維持性，可用以追蹤多次傳代細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)特性。其有著強(qiáng)而穩(wěn)定的紅色熒光(Ex/Em=553/570nm)，與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性，適合做多重指標(biāo)染色。 CM-Dil水溶性較好，便于懸浮細(xì)胞和固定細(xì)胞染色溶液的制備；工作濃度下，此染料無細(xì)胞毒性，不會(huì)影響細(xì)胞活力以及增殖能力。一些細(xì)胞經(jīng)CM-Dil染色后，可在后續(xù)的固定，透化和石蠟包埋處理中維持穩(wěn)定的標(biāo)記，因此特別適用于同時(shí)做細(xì)胞膜標(biāo)記以及后續(xù)的免疫組化，熒光原位雜交或者電鏡觀察的實(shí)驗(yàn)。 研究證實(shí)，CM-DiI標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定，陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上，標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好，能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況；或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi)，可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。 CM-DiI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光，熒光波長：λex=553 nm,λem=570 nm。 儲(chǔ)存條件：-20避光保存。 有效期：一年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 3 ?鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白X抗體包裝5g
蘆筍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 3 ?GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g
蘆竹根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 3 ?γ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈2抗體包裝250mg
蘆竹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 4 ?原鈣粘蛋白γA1抗體包裝5g
魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體70抗體包裝1g
鹿角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體71抗體包裝5g
鹿茸（馬鹿）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?谷受體δ2/GluR-δ2抗體包裝25g
鹿茸（梅花鹿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝5g
鹿銜草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 4 ?谷脫羧67抗體包裝1g
路邊青（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?生長抑制DNA損傷基因45抗體包裝25g
路路通內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?胃泌抑制肽抗體包裝5g
路路通（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體包裝1g
綠包藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?磷脂酰基蛋白聚糖-3抗體包裝5g
綠茶（茶葉）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?糖皮質(zhì)激受體抗體包裝1g
綠萍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Molecular sieves, 5 ?胰高血糖樣肽-1抗體包裝5g
: Robinson資源名稱: 問號(hào)狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格：>95%前列腺E2試劑盒毛萼結(jié); Maoecrystal A
球毛殼霉Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于培養(yǎng)前列腺E1試劑盒莫諾宗 ;4-Benzyloxyphe
: ATCC35106資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前列腺D合成試劑盒馬錢堿;Brucine
細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil大麗花輪枝孢 3-(Boc-氨甲基)氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽性別決定區(qū)Y框蛋白1Elisa
布魯氏?。?/span>+）陽性血清 1-[2-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1Elisa
孟氏假單胞 D-高苯氨酸乙酯鹽酸鹽心肌肌鈣蛋白TElisa
香菇 β-1,3-葡聚糖α橫紋肌肌動(dòng)蛋白Elisa
莫氏克羅諾桿 Amberlyst® A21 大孔樹脂脊髓灰質(zhì)炎病抗體Elisa
醋化醋桿 聚D-230乙型流感嗜血桿抗體Elisa
戴爾根霉 果聚糖腦膜炎雙球抗體Elisa
紅霉鏈霉 微球核酸 來源于金黃色葡萄球(株ATCC #27735)囊泡單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2Elisa
釀酒酵母 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員11Elisa
土曲霉 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa
短桿狀馬賽 右旋糖酐鐵5-羥色受體4Elisa
香菇 醋酸丁酸纖維5-羥色受體1BElisa
巴氏醋桿 醋酸丁酸纖維眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa
明膠樣鏈霉 醋酸丁酸纖維精氨酸脫亞Elisa
紫丁香蘑 醋酸丁酸纖維色氨酰tRNA合成Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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