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          細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-21 16:01:45瀏覽次數(shù):621

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 200μl
          貨號(hào) GOY-01X9873 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil公司*的產(chǎn)品:Phospho-Stat2 (Tyr690) 化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體3,5-二-2-羥苯磺鈉 99%
          STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體N-羥琥珀酰亞 98%
          phospho-STAT3 (Thr705) 化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體N-代丁二酰亞 97%
          phospho-STAT3 (Ser727) 化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil

          英文名稱:

          產(chǎn)品規(guī)格:200μl

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          細(xì)胞膜熒光染料CM-DiI 是一種新型細(xì)胞膜染料,通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細(xì)胞,適合監(jiān)測細(xì)胞運(yùn)動(dòng)以及細(xì)胞定位分析。因具有良好的染料維持性,可用以追蹤多次傳代細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)特性。其有著強(qiáng)而穩(wěn)定的紅色熒光(Ex/Em=553/570nm),與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性,適合做多重指標(biāo)染色。

          CM-Dil水溶性較好,便于懸浮細(xì)胞和固定細(xì)胞染色溶液的制備;工作濃度下,此染料無細(xì)胞毒性,不會(huì)影響細(xì)胞活力以及增殖能力。一些細(xì)胞經(jīng)CM-Dil染色后,可在后續(xù)的固定,透化和石蠟包埋處理中維持穩(wěn)定的標(biāo)記,因此特別適用于同時(shí)做細(xì)胞膜標(biāo)記以及后續(xù)的免疫組化,熒光原位雜交或者電鏡觀察的實(shí)驗(yàn)。

          研究證實(shí),CM-DiI標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達(dá)穩(wěn)定,陽性標(biāo)記率達(dá)98%以上,標(biāo)記細(xì)胞形態(tài)良好,能有效地觀察細(xì)胞在體外的誘導(dǎo)分化情況;或?qū)?biāo)記的細(xì)胞注入體內(nèi),可以有效的顯示移植細(xì)胞在活體組織中的遷移及分化。

          CM-DiI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光,熒光波長:λex=553 nm,λem=570 nm。

          儲(chǔ)存條件:-20避光保存。

          有效期:一年。

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 3 ?鳥嘌呤核苷結(jié)合蛋白X抗體包裝5g

          蘆筍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 3 ?GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g

          蘆竹根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 3 ?γ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈2抗體包裝250mg

          蘆竹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?原鈣粘蛋白γA1抗體包裝5g

          魯斯考皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體70抗體包裝1g

          鹿角(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?G蛋白偶聯(lián)受體71抗體包裝5g

          鹿茸(馬鹿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?谷受體δ2/GluR-δ2抗體包裝25g

          鹿茸(梅花鹿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝5g

          鹿銜草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 4 ?谷脫羧67抗體包裝1g

          路邊青(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?生長抑制DNA損傷基因45抗體包裝25g

          路路通內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?胃泌抑制肽抗體包裝5g

          路路通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體包裝1g

          綠包藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?磷脂酰基蛋白聚糖-3抗體包裝5g

          綠茶(茶葉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?糖皮質(zhì)激受體抗體包裝1g

          綠萍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Molecular sieves, 5 ?胰高血糖樣肽-1抗體包裝5g

          : Robinson資源名稱: 問號(hào)狀鉤端螺旋體 質(zhì)量規(guī)格:>95%前列腺E2試劑盒毛萼結(jié); Maoecrystal A

          球毛殼霉Chaetomium│globosum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于培養(yǎng)前列腺E1試劑盒莫諾宗 ;4-Benzyloxyphe

          : ATCC35106資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前列腺D合成試劑盒馬錢堿;Brucine
          細(xì)胞膜染色試劑CM-Dil大麗花輪枝孢 3-(Boc-氨甲基)氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽性別決定區(qū)Y框蛋白1Elisa

          布魯氏?。?/span>+)陽性血清 1-[2-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1Elisa

          孟氏假單胞 D-高苯氨酸乙酯鹽酸鹽心肌肌鈣蛋白TElisa

          香菇 β-1,3-葡聚糖α橫紋肌肌動(dòng)蛋白Elisa

          莫氏克羅諾桿 Amberlyst® A21 大孔樹脂脊髓灰質(zhì)炎病抗體Elisa

          醋化醋桿 聚D-230乙型流感嗜血桿抗體Elisa

          戴爾根霉 果聚糖腦膜炎雙球抗體Elisa

          紅霉鏈霉 微球核酸 來源于金黃色葡萄球(株ATCC #27735)囊泡單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2Elisa

          釀酒酵母 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員11Elisa

          土曲霉 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Elisa

          短桿狀馬賽 右旋糖酐鐵5-羥色受體4Elisa

          香菇 醋酸丁酸纖維5-羥色受體1BElisa

          巴氏醋桿 醋酸丁酸纖維眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa

          明膠樣鏈霉 醋酸丁酸纖維精氨酸脫亞Elisa

          紫丁香蘑 醋酸丁酸纖維色氨酰tRNA合成Elisa 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

           


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