商品介紹:
Piperine是從胡椒中分離的天然生物堿,可以抑制P-glycoproteinandCYP3A4的活性,在HeLa細(xì)胞中的IC50值為61.94±0.054μg/mL。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):94-62-2 別名:Bioperine;1-Piperoylpiperidine 純度:98.76% 分子量:285.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
泛菌屬20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體Human AMPK gamma2 ELISA Kit人脂聯(lián)受體2(ADIPOR2)免疫試劑盒
鷲峰假絲酵母20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框107抗體Human AKAP1 ELISA Kit人脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)免疫試劑盒
派倫霉屬20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框117抗體Human ALY ELISA Kit人脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
天藍(lán)色鏈霉菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框118抗體Human ACP1 ELISA Kit人脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框144抗體Human ADNP ELISA Kit人脂肪結(jié)合蛋白4(FABP-4)免疫試劑盒
大腸埃希菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框151抗體Human ACP6 ELISA Kit人脂肪甘油三酯脂(ATGL)免疫試劑盒
平臍蠕孢菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框78抗體Human ADRA2B ELISA Kit人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)免疫試劑盒
紅色皺紋單胞菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框187抗體Human ACPT ELISA Kit人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒
平臍蠕孢菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體Human ADRP/Perilipin 2 ELISA Kit人脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病菌)20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框152抗體Human ACSL4/FACL4 ELISA Kit人脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框165抗體Human ACSL5 ELISA Kit人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)免疫試劑盒
玫瑰紫青霉20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框166抗體Human ADSS ELISA Kit人整合連接激1(ILK-1)免疫試劑盒
Chitinophaga rupis20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框173抗體Human AKR1CL2 ELISA Kit人整合β4結(jié)合蛋白(ITGB4BP)免疫試劑盒
棕黑腐質(zhì)霉20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體Human AKR1D1 ELISA Kit人整合αM型(ITG αM/CD11b) 免疫試劑盒
黑根霉20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框30抗體Human AKT3(Protein kinase Akt-3) ELISA Kit人整合αⅤβ3(ITG αⅤβ3)免疫試劑盒
聚生殼菌20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體Human AFAP1L1 ELISA Kit人整合α4(ITGA4/CD49D)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>50 U /mg,BCN -基- D -天冬抗體IgG試劑盒7-氧基
苜蓿中華根瘤菌Sinorhizobium│meliloti 質(zhì)量規(guī)格:商品級(jí)MYC誘導(dǎo)核抗原試劑盒枸櫞血根堿
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMAX二聚化蛋白1試劑盒
P-glycoproteinand CYP3A4抑制劑(Piperine)鹽噻噸英文名稱: Pyrophosphoric acid魚精蛋白2抗體包裝5g
鹽英文名稱: Quininepiwi樣4蛋白抗體包裝1g
鹽黃酯英文名稱: Red oilpiwi樣3蛋白抗體包裝5g
鹽噻/泊酚雜質(zhì)J英文名稱: Retrorsine豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍(lán)耳病病抗體包裝100g
鹽英文名稱: Rhodamine B base凋亡相關(guān)蛋白10抗體包裝25g
鹽氧普英文名稱: Rhodanine鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷抗體包裝5g
鹽氧那明英文名稱: S-Acetylthiocholine iodide絲/蘇蛋白激PIM3抗體包裝100g
鹽金剛烷英文名稱: S-Acetylthioglycolic acid N-hydroxysuccinimide ester組蛋白精基轉(zhuǎn)移5抗體包裝25g
鹽金剛乙英文名稱: Salicyl alcohol原鈣粘附蛋白11X抗體包裝5g
鹽雷洛昔芬英文名稱: SB3-18原鈣粘附蛋白11Y抗體包裝100g
鹽雷莫司瓊英文名稱: Selenium (IV) oxide原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體包裝25g
鹽雷尼替丁英文名稱: Sesamol原鈣粘附蛋白17抗體包裝5g
鹽英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白1抗體包裝1g
鹽利托君英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α1抗體包裝5g
鹽硫利達(dá)英文名稱: Silica gel for column chromatography原鈣粘附蛋白α3抗體包裝25ml