公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):RIP1抑制劑(RIPA-56)
英文名稱(chēng):RIPA-56
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
RIPA-56是一種高效選擇和代謝穩(wěn)定的受體相互作用蛋白1(RIP1)抑制劑,其中IC50值為13nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1956370-21-0 純度:99.86% 分子量:221.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
金針菇β晶體蛋白B1抗體Human GBP4 ELISA Kit小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒
粉紅單端孢磷化Bax抗體Human GDAP2 ELISA Kit小鼠GTP KRas 免疫試劑盒
大腸埃希氏菌磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDE1 ELISA Kit小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒
狂犬病病磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDI1 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒
黑曲霉磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GBP5 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒
雙孢蘑菇磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GDI2 ELISA Kit小鼠FAM84A蛋白(FAM84A)免疫試劑盒
靈芝(紅芝, 赤芝)肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體Human GBP6 ELISA Kit小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒
佛羅里達(dá)側(cè)耳磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GCAT ELISA Kit小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒
玫煙色棒束孢磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GAS8 ELISA Kit小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒
香菇障礙自整合蛋白BAF抗體Human GATA1 ELISA Kit小鼠E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒
網(wǎng)紋馬勃磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GATA3(GATA Binding Protein 3) ELISA Kit小鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒
劉氏菌屬磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GATA6 ELISA Kit小鼠D-乳免疫試劑盒
微白黃鏈霉菌磷化B-Raf抗體Human GATAD2B ELISA Kit小鼠D-甘油3-磷免疫試劑盒
碗狀瘤杯菌磷化B-Raf抗體Human GATC ELISA Kit小鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化B-Raf抗體Human GBA2 ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)免疫試劑盒
無(wú)磷化B-Raf抗體Human GATM ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)免疫試劑盒
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>0.1 U/mg,BCβ,β胡蘿卜9',10'加氧試劑盒七葉樹(shù)皂苷B
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:染料含量:>80%,BSα-烯化試劑盒8-去乙?;釣鯄A
扁刺齒菌Steccherinum│rawakense (Pers.) Banker 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα戊二脫氫試劑盒羥基吳茱萸堿
RIP1抑制劑(RIPA-56)鳶尾黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dyclonine hydrochloride核受體蛋白NR2E1抗體包裝5g
原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SGI1027神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2抗體包裝250mg
原百部堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Bromhexine HCl腦特異性蛋白BPX抗體包裝100mg
原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): R848,Resiquimod核纖層蛋白A識(shí)別因子抗體包裝100mg
原兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): N-(Hydroxymethyl)nicotinamideNOGO相互作用線(xiàn)粒體蛋白1抗體包裝100g
原花青B1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pasiniazid神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體包裝25g
原花青B2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Trepibutone神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關(guān)蛋白)包裝5g
原花青(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Trapidil神經(jīng)連接蛋白2抗體包裝1g
原人參二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): CINAMETIC ACIDNIPA樣蛋白3抗體包裝5g
原人參三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Orazamide軸突生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子3抗體包裝100ml
原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 3-ETHYL-3-METHYLGLUTARIMIDE軸突蛋白3抗體包裝25ml
原蘇木B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dequalinium chloride1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體包裝1g
原偽金絲桃英文名稱(chēng): BERBERINE ACID SULFATE神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體包裝100g
遠(yuǎn)志(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Domiphen bromide神經(jīng)前體發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體包裝25g
遠(yuǎn)志口山;遠(yuǎn)志山III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ulipristal acetate泛結(jié)合E2F抗體包裝25g