商品介紹:
細(xì)胞膜染色試劑盒是用一種親脂性的橙色熒光探針進(jìn)行細(xì)胞膜染色。染色液I 進(jìn)入細(xì)胞膜后,在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。染色液I在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),被激發(fā)后可以發(fā)出橙色的熒光,具有很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。 染色液I 通常不會(huì)明顯影響細(xì)胞的活力,因此被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。 儲(chǔ)存條件:4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期:六個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:細(xì)胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:1000T|5000T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
連翹酯苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Hydroxy-5-nitronicotinic acidB淋巴生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體包裝25g
蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexatriacontane鱗狀癌增強(qiáng)蛋白1抗體包裝5g
蓮心堿高鹽英文名稱: HexatriacontaneGα gust抗體包裝1g
蓮心堿高鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexadecane谷??贵w包裝10g
蓮須(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexadecane絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體包裝50g
蓮子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-HexanolG蛋白結(jié)合蛋白5抗體包裝1g
蓮子心(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Hexanol腫瘤/抗原家族4亞型7抗體包裝25g
兩面針(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-HexadecanolGDNF家族受體α3抗體 GFR α3包裝5g
亮菌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1,6-Hexanediol甘受體β/GlyR β抗體包裝100g
遼東楤木皂苷X(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Heptadecane神經(jīng)甘肽樣肽GALP抗體包裝25g
了哥王(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hentriacontane甘肽受體2抗體包裝5g
烈香杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hexacosane甘肽受體3抗體包裝1g
烈香杜鵑油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,5-Hexanedione腦腸肽受體抗體包裝25g
林生續(xù)斷苷I英文名稱: 2,5-HexanedioneGRC5蛋白抗體包裝5g
林澤蘭內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester腸和大腦特定同源蛋白1抗體包裝1g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,可用于培養(yǎng)羥脯試劑盒沒食子兒茶;(-)-Gallocate
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品強(qiáng)啡肽試劑盒木糖;D-Xylose
蛹假交替單胞菌Pseudoalteromonas│undina 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%潛伏轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2試劑盒3-O-沒食子酰粘;3-O-gallo
細(xì)胞膜染色試劑盒(橙色熒光)-M03香菇 二硅化鉻磷酸化過氧化物體增殖物激活受體γ抗體Elisa
假單胞 化鉿防御α2Elisa
膠孢 碲化銀(I)防御α3Elisa
金色毛殼 (S)-(-)-3-氨基奎寧 活化蛋白C抵抗Elisa
Pseudomonas plecoglossicida 2,3,9,10,16,17,23,24-八辛氧基-29H,-31H-酞菁染料多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移7Elisa
Xenorhabdus 對(duì)傘花烴鎘金屬硫蛋白Elisa
阿氏芽孢桿 優(yōu)葛縷酮成纖維生長因子6Elisa
大腸桿 雷沙吉蘭無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員9AElisa
釀酒酵母 氯化(茚基)雙(三苯基膦)釕(II)肌蛋白Fbox-1Elisa
非無藥品 沙門(陽性) Ampiroxicam肌肉特異性泛蛋白連接1Elisa
費(fèi)氏中華根瘤 甲基叔戊基活化轉(zhuǎn)錄因子6Elisa
枝狀枝孢 甲氧基聚乙二馬來酰前列腺分泌蛋白Elisa
稻平臍蠕孢 β-Calcitonin Gene Related Peptide human流感病A IgM抗體Elisa
青銅色小單孢 4-溴-3-甲囊蟲病Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 5(6)-TAMRA [5-(6)-Carboxytetramethylrhodamine]副流感病1,2,3型IgG抗體Elisa