商品介紹:
Oclacitinib maleate是一種新型JAK抑制劑。Oclacitinib抑制JAK1有效,IC50為10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1208319-27-0 別名:PF-03394197 maleate 純度:99.53% 分子量:453.51 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
盾形環(huán)柄菇磷化動力相關(guān)蛋白1抗體Human PITPNC1 (Cytoplasmic phosphatidylinositol transfer protein 1) ELISA KIT人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)免疫試劑盒
西瓜枯萎病菌(可訂)DNA連接4抗體Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT人Seryl- tRNA合成,質(zhì)(SARS/SERS)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌二肽基肽6抗體Human NAGA(Alpha-N-acetylgalactosaminidase) ELISA Kit人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒
側(cè)耳二氫葉還原抗體Human CACNA1A(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit人Salusin Alpha(Salusin α)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體Human NKAP(NF-kappa-B-activating protein) ELISA Kit人SAA/LDL復(fù)合物 免疫試劑盒
蓖麻油鑒別試劑有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體Human PTDSS1 (Phosphatidylserine synthase 1) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)免疫試劑盒
紅淡紫灰鏈霉菌DOM3Z蛋白抗體Human PCID2 (PCI domain-containing protein 2) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)免疫試劑盒
麥芽糖假絲酵母蓬亂蛋白2抗體Human PDIK1L (Serine/threonine-protein kinase PDIK1L) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)免疫試劑盒
中國臺灣無色需堿菌磷化蓬亂蛋白2抗體Human PELI3 (E3 ubiquitin-protein ligase pellino homolog 3) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體Human MYH11(Myosin-11) ELISA Kit人S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)免疫試劑盒
葉生布勒擔(dān)子酵母脫氫/還原家族成員2抗體Human PROCA1 (Protein PROCA1) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒
谷棒桿菌牙本質(zhì)磷蛋白抗體Human R3HDML (Peptidase inhibitor R3HDML) ELISA KIT人S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Dermokine β蛋白抗體Human PPP1R13B (Apoptosis-stimulating of p53 protein 1) ELISA KIT人RNA結(jié)合蛋白FUS(FUS/TLS)免疫試劑盒
柔嫩艾美耳球蟲DPCR1蛋白抗體Human POMK (Protein O-mannose kinase) ELISA KIT人Rho家族GTP1(RND1)免疫試劑盒
Methylobacterium variabile表皮源性蛋白6抗體Human PKN1 (Serine/threonine-protein kinase N1) ELISA KIT人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)免疫試劑盒
金耳雙特異性蛋白磷7抗體Human METRN(Meteorin) ELISA Kit人Rho GDP解離抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)免疫試劑盒
龜裂鏈霉菌Streptomyces│rimosus 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml睪
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體: 10%HCl
: =NRRL1808資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,基體:HCI
JAK抑制劑(Oclacitinib maleate)布林佐(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Axitinib胱抗體包裝5g
布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azaperone胰凝乳蛋白B抗體包裝1g
布美他尼;丁氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azasetron HCl補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白2抗體包裝5g
草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Azelastine base 分化促進(jìn)因子77抗體包裝25g
草依地普侖/草艾普蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bacitracin Zinc 半胱蛋白抑制劑樣蛋白1抗體包裝5g
茶海明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benazepril HydrochlorideCTBS蛋白抗體包裝25g
蟾它靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benazepril Hydrochloride硫軟骨β1/β-1,4-GalNAc-T抗體包裝5g
蟾酥;華蟾酥基;華蟾精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bezafibrate硫軟骨聚合3抗體包裝25g
長春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bezafibrate胎盤催乳1/2抗體包裝5g
長春(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Blonanserin酪激C-SRC抗體包裝25g
長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brivudine磷化酪激C-SRC抗體包裝5g
朝藿定B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brivudine酪蛋白激1/casein kinase Iα抗體包裝1g
赤蘚紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cabazitaxel半胱延伸蛋白α抗體包裝1g
醋己鋅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mitoxantrone磺基轉(zhuǎn)移CSPS抗體包裝100g
醋谷/乙酰谷酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lamotrigine富含半胱蛋白2抗體包裝25g