ANG-R-Tie1血管生成素受體Tie1ELISA Kit不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

ELISA Kit檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)多，更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)，是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴。

產(chǎn)品名稱	英文名稱	貨號(hào)
ANG-R-Tie1血管生成素受體Tie1ELISA Kit	ANG-R-Tie1 ELISA Kit	GOY-E100162

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100µL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
注意事項(xiàng)：
1.加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG 靈芝 Ganoderma lucidiumYAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

三酯(standard for GC,>99.5%) 質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5% Tributyl phosphate 類固5α還原酶1(SRD5α1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)

原蘇木素B;Protosappanin 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 20mg 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體 CK 18-M30 ELISA Kit 細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑盒

鈣紅,二醛縮雙（鄰氨基酚） 質(zhì)量規(guī)格：AR；98% Glyoxal-bis(2-hydroxyanil) 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱：A172

梓 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 20mg 人α-2巨球蛋白(Alpha-2-M)ELISA試劑盒人96T7.8-500 ng/mL小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)ELISA試劑盒，英文名：NPY ELISA Kit

金剛 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 ELISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒，英文名：Cyclin-D1 ELISA Kit

洋川芎內(nèi)酯I 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial ELISA Kit for Human Iron-responsive element-binding protein 2小鼠腸型脂肪結(jié)合蛋白(FABP2)ELISA試劑盒，英文名：FABP2 ELISA Kit

比布里希猩紅(>90%,BS) 質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS Biebrich scarlet 白介素16(IL16)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interleukin 16 (IL16)

L-精氨 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 20mg 激活素受體2B抗體 PS-1 ELISA Kit 早老素1(PS-1)ELISA試劑盒

雷奈鍶 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98% Strontium Ranelate 香菇 Lentinula edodes微小鏈霉菌 Streptomyces parvullus

染料木素;染料木黃;金雀異黃 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 維生素B6(Vitamin B6)ELISA試劑盒通用96T3.12-200 nmol/L大鼠成肌分化蛋白(MyoD)ELISA試劑盒，英文名：MyoD ELISA Kit

楊梅素/楊梅（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 Myricetin 人腎細(xì)胞英文名稱：OS-RC-2

凍干人凝血酶品 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： 127 IU/支 ELISA Kit for Hydroxylysine小鼠過(guò)氧化還原酶6(PRDX6)ELISA試劑盒，英文名：PRDX6 ELISA Kit

ANG-R-Tie1血管生成素受體Tie1ELISA KitTCBS瓊脂    250(g)

HE瓊脂（HE）    1000(g)

乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基    250(g)

卡那霉素七葉甙疊氮瓊脂基礎(chǔ)(CM0591)    Oxoid　

麥芽汁瓊脂 (CM0247)    Oxoid　

卵黃亞碲酸鹽增菌液    與Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)合用，用于金黃色葡萄球菌選擇性培養(yǎng)100ML*6

XLD Agar    

李斯特氏菌選擇富集添加劑    

DEV Lactose broth DEV乳糖肉湯    1.10689.0500MERCK默克

抗生素檢定培養(yǎng)基2號(hào)（pH 7.9±0.1）    250(g)

嗜鹽菌選擇性瓊脂    250(g)

使用方法：
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。，酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。