尼氏染色液(甲基紫法)公司*的產(chǎn)品：Gax/FITC 熒光標(biāo)記生長終止特異性同源盒因抗體IgG硝汞 AR,98.5%（劇品）
GCK/FITC 熒光標(biāo)記抗葡萄糖激抗體IgGβ-巰 AR,99.0%（劇品）
GCN2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠蛋白激GCN2蛋白抗體IgG發(fā)煙硝 GR
Phospho-GCN2 (Thr898) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化蛋白激GCN

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：尼氏染色液(甲基紫法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：2×50ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

異佛司可林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE型肝炎病非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體包裝500g

異甘草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Clemastine fumarateNoxa蛋白抗體包裝1g

異甘草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Clemastine fumarateP53誘導(dǎo)凋亡抑制蛋白抗體包裝5g

異橄欖樹脂英文名稱： Ketotifen fumarate磷化酪激B抗體包裝1g

異杠柳苷;杠柳苷元-3-O-β -葡萄糖（1-4）-...英文名稱： 2-Oxohexamethylenimine磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝250mg

異鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Benproperine phosphate磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g

異葒草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Minoxidil線粒體復(fù)合物NDUFS4蛋白抗體包裝25g

異槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脫氫α家族8抗體包裝500g

異黃腐英文名稱： 7-Hydroxy-4-methylcoumarinNADH脫氫黃蛋白1抗體包裝1g

異黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Testosterone undecanoateNADH脫氫黃蛋白2抗體包裝5g

異黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DipyridamoleNADH氧化還原輔1抗體包裝1g

異黃芪皂苷IV(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： S-Carboxymethyl-L-cysteine膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體包裝5g

異茴芹內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Isosorbide dinitrate磷化谷受體2B抗體包裝1g

異苦參英文名稱： Laurocapram磷化谷受體2A+2B抗體包裝5g

異類葉升麻苷；異毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Oxymetazoline hydrochloride高度相似的周期蛋白激NEK6抗體包裝1g

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品堿性胎兒蛋白試劑盒次野鳶尾黃;Irisflorentin

黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格：>99%,鹽鹽堿性磷試劑盒穿琥寧;Kalii Dehydrogra

鼠李糖乳桿菌Lactobacillus│rhamnosus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品堿性亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白試劑盒芒柄花;Formononetin
尼氏染色液(甲基紫法)枯草芽孢桿 三苯基化硫Elisa

隱花青鵝膏 苯磺酸甲酯一磷酸腺苷Elisa

艾高夫氏亮 獨活酊一氧化氮Elisa

粗壯假絲酵母 丁香葉油一氧化氮合成Elisa

黃蓋小脆柄菇 玫瑰草油一氧化氮合成1Elisa

芝麻?；?/span> 1-BOC-4-氨基引唑胰蛋白Elisa

接骨木鐮孢 3,5-二氟-4-(2,2,2-三氟乙氧基)胰島Elisa

雞傷寒沙門氏 液體石蠟胰島降解Elisa

布氏白僵 N-甲基-N-亞硝基對甲苯磺酰胰島樣生長因子1Elisa

謝瓦氏曲霉 Boc-D-4-氨酸胰島樣生長因子2Elisa

蘋果鏈格孢 纈草根提取物胰島樣因子5Elisa

釀酒酵母 肉豆蔻油胰島原Elisa

阿布拉鏈霉 4,4'-二二苯基砜胰島自身抗體Elisa

異樣纖維單胞 5-氮雜-2-甲酸胰淀粉Elisa

瑞士乳桿 苯扎銨胰高血糖Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)