conn改良Weigert革蘭染色液公司正在出售的產(chǎn)品：HSTF2/HSF2 /FITC 熒光標(biāo)記熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG二苯磺鈉 IND
HtrA2/Omi/FITC 熒光標(biāo)記絲氨蛋白/線粒體絲氨蛋白抗體IgGN,N-二對(duì)苯二草鹽 AR,98%
TRT/FITC 熒光標(biāo)記端?？贵wIgG二烯苯, 包含1000ppm 4-叔丁鄰苯二酚穩(wěn)定劑, Standard for G
TRT/TERT/

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
磺吡啶英文名稱： Allatostatin IV磷化蛋白激C抗體 PKC ε包裝5g

磺氧噠英文名稱： Amylin,humanⅡ型膠原α1 N端前體肽抗體包裝100mg

磺嘧啶銀英文名稱： Angiotensin A腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體包裝50mg

磺噻唑英文名稱： Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitorp400蛋白抗體包裝1g

磺達(dá)肝癸鈉英文名稱： Angiotensinogen (1-14) ,Rat血小板源性生長(zhǎng)因子C抗體包裝5g

茴三硫;膽維他英文名稱： Anti-Kentsin血小板源性生長(zhǎng)因子D(脊髓源性生長(zhǎng)因子B)包裝1g

磺司特英文名稱： Atrial Natriuretic Peptide (1-28),rat非典型蛋白激C特定相互作用蛋白抗體包裝5g

磺多拉司瓊英文名稱： Atrial Natriuretic Peptide (126-149) (rat)原鈣粘蛋白13抗體包裝100mg

磺加貝酯英文名稱： Atrial Natriuretic Peptide (126-150) (rat) 26S蛋白調(diào)節(jié)亞型抗體包裝500mg

磺加替沙星英文名稱： Atriopeptin I (rat)原鈣粘蛋白β11抗體包裝1mg

磺雷沙吉蘭英文名稱： Atriopeptin II (rat, rabbit,mouse)軸周蛋白PRX抗體包裝500ug

磺羅哌英文名稱： Atriopeptin III (rat)豬藍(lán)耳病病GP5蛋白抗體包裝5mg

磺瑞波英文名稱： Band 3 Protein (547-553)(human)p21激活激1抗體包裝1g

基英文名稱： Band 3 Protein (824-829)(human)蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體包裝100g

硫二馬尼/二馬尼硫鹽英文名稱： bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin脯酰羥化抗體包裝25g

暫無(wú)Phaeoacremonium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR花生四烯5脂氧合試劑盒白花前胡;Praeruptorin

蘋果榦腐爛殼囊孢Cytospora│mandshurica 質(zhì)量規(guī)格：>95%花生四烯15脂加氧試劑盒酰次;Benzoylhypac

柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品花生四烯12 - 脂氧合，12S型試劑盒白樺脂;Betulinic acid
conn改良Weigert革蘭染色液米氏假單胞 4-羥基肉桂酸甲酯胰腺再生蛋白3βElisa

糙皮側(cè)耳 3,4-二甲氧基白介27αElisa

磚紅鐮孢 2-氨基-5-羥基肉堿棕櫚酸轉(zhuǎn)移Elisa

藤黃交替紅色桿 堿式碳酸鎳(Ⅱ)水合物肉堿棕櫚酸轉(zhuǎn)移1Elisa

煙曲霉 4-基-2-氟吡啶肉堿棕櫚酸轉(zhuǎn)移2Elisa

Marivita litorea 3-基-2-氟吡啶甘油一酯轉(zhuǎn)?；鵈lisa

長(zhǎng)雙歧桿 甲氧基乙酸乙酯二酰基甘油?；D(zhuǎn)移Elisa

 基乙酸乙酯微粒體甘油三酸酯運(yùn)轉(zhuǎn)蛋白Elisa

大腸桿屬 2-硝基-5-氟甲酯同種異體移植炎癥因子1Elisa

慢生根瘤 1,9-壬二去乙?；疎lisa

炭疽芽胞桿 5-氟-2-硝基三氟甲苯BCA蛋白Elisa

嗜冷桿屬 2-甲基戊酸乙酯半胱氨酸蛋白3Elisa

杏鮑菇 1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯半胱氨酸蛋白8Elisa

白靈菇 2,3-二芐半胱氨酸蛋白9Elisa

病研所芽孢桿 4-氟水楊酸甲酯C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9Elisa