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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：人淋巴細胞分離液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：200ml
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
人淋巴細胞分離液采用優(yōu)質(zhì)原料科學(xué)配方配制而成。適用于從血液及組織勻漿中分離所需細胞。本品為無菌溶液。 儲存條件：室溫(18-25℃)避光保存。 開封后 2-8℃保存。 有效期：兩年。 使用方法： 由于各離心機的性能差異以及實驗室的溫度不同，佳分離條件(離心轉(zhuǎn)速、離心時間等)請根據(jù)實際摸索。 1．取新鮮抗凝血 1ml，與1ml Hank’s液混勻。 2．將以上液體小心加于 1ml的細胞分離液的液面上。 3．以 1500RPM離心15分鐘。 4．此時離心管中由上至下細胞分四層。第一層：血漿或組織勻漿液層。第二層：環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層：透明分離液層。第四層：紅細胞層 ● 此紅細胞層，表面有懸起的部分白細胞層。收集界面上的細胞，放入含 4-5毫升Hank’s 液的試管中，充分混勻后，以1500-2000RPM離心10分鐘。收集第二層細胞(淋巴細胞)沉淀經(jīng)2次洗滌收集細胞。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
利福噴丁(標準品)英文名稱： Fudosteine鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體包裝250mg
利福平(標準品)英文名稱： Fudosteine半胱蛋白蛋白-6抗體（C端）包裝50mg
利福昔明(標準品)英文名稱： Rocuronium Bromide周期A2抗體包裝1g
利可君（標準品）英文名稱： Roxithromycin鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體包裝25g
利拉萘酯(標準品)英文名稱： Roxithromycin鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2b/2γ抗體包裝5g
利魯唑（標準品）英文名稱： Selegiline HCl凋亡敏感性基因抗體包裝100g
利培（標準品）英文名稱： 3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL天冬-胱特異性蛋白家族抗體包裝500g
利塞膦（標準品）英文名稱： Sertraline HCL半胱蛋白-10抗體包裝1g
利塞膦鈉（標準品）英文名稱： Sertraline HCL半胱蛋白蛋白-12抗體包裝5g
利托那韋(標準品)英文名稱： SN38(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin )半胱蛋白蛋白-13抗體包裝100g
聯(lián)芐（標準品）英文名稱： SparfloxacinCD10抗體包裝25g
聯(lián)芐唑(標準品)英文名稱： SparfloxacinCD105抗體包裝5g
聯(lián)雙酯(標準品)英文名稱： Afloqualone干生長因子受體/表面分化抗原抗體包裝1g
鏈脲佐菌（標準品）英文名稱： Afloqualone離子通道蛋白2抗體包裝25g
兩性霉B(標準品)英文名稱： Sufacetamide sodium角蛋白5抗體包裝5g
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR纖維蛋白原試劑盒脫氫紫堇堿;Dehydrocorydal
黑木耳Auricularia│auricula 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物試劑盒天冬酰;L-Asparagine
紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：純度大于98%纖溶原試劑盒L-天冬;L-Aspartic ac
人淋巴細胞分離液皮傘 2-(4-溴基)酸過氧化物Elisa
波那雷恩沙門氏 L-2,4-二氯苯氨酸脂蛋白相關(guān)磷脂A2Elisa
運動節(jié)桿 辛酸甲酯纖溶原激活物抑制因子2Elisa
雅致小克銀漢霉 二二甲,異構(gòu)體混合物基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
蟬花1-9 2,2'-氧二乙酸內(nèi)皮分泌蛋白 SCUBE2Elisa
枯草芽胞桿 苯黑腺病Elisa
氧化微桿 4-芐基哌鹽酸鹽副流感病IgM抗體Elisa
淤泥大洋芽孢桿 谷維呼吸道合胞病Elisa
釀酒酵母 N,N′-乙撐雙硬脂酰膠原蛋白三螺旋重復(fù)包含蛋白1Elisa
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 4-氨基-3,5-二氟苯晶狀體球蛋白αBElisa
金針菇 鹽酸多奈哌齊維生KElisa
穿孔假單胞 (3S,4R)-4-(4-氟苯基)-3-羥甲基-1-甲基HLAⅡ類組織相容性抗原DP鏈Elisa
嗜淀粉乳桿 亞甲基氨基乙HLAⅡ類組織相容性抗原DQ鏈Elisa
枯草芽孢桿 16,17-環(huán)氧脫氧核糖核酸13Elisa
鏈格孢 N,N-二甲基-3-氯日本腦炎病IgM抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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