Verh eff彈力纖維染色液公司正在出售的產(chǎn)品： Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC 熒光標(biāo)記α-連環(huán)蛋白抗體（α-α鏈接）IgG組 99%
Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光標(biāo)記 β-連環(huán)蛋白抗體IgGL-高苯氨 98%
Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化β

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
大波斯菊苷,芹菜-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱： Sulbactam Sodium核蛋白4抗體（Ran結(jié)合蛋白4）包裝100g

大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 18-beta-glycyrrheticacid免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體包裝25g

大豆苷,黃豆苷 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 18-beta-glycyrrheticacid胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7抗體包裝100ml

大豆,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tryptone 胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體包裝500ml

大風(fēng)子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： β-NaphthoflavoneKB抑制蛋白激ε包裝500mg

大腹皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Clorsulon整合β4抗體包裝5MG

大果木姜子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Clorsulon磷化白介-7受體a抗體包裝1g

大紅袍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium L-ascorbyl-2-phosphate磷化胰島受體底物-1抗體包裝5g

大黃(掌葉大黃)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3-Isobutyl-1-methylanxthine磷化胰島受體底物2抗體包裝1g

大黃（藥用大黃）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝250mg

大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Procaine hydrochloride磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g

大黃酚-8-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vorinostat impurity磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Swertianolin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝5g

大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： saponin磷化KB抑制蛋白激β抗體包裝1g

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Aloperine磷化整合連接激1抗體包裝250mg

ATCC12344=DSM20565=NCTC8198資源名稱: 釀膿鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格：≥98%可溶性CD404-磺酰基肼鹽鹽;4-Sulfon

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性CD38試劑盒亥茅酚苷;Sec-O-Glucosylh

粉紅擲孢酵母Sporobolomyces│roseus 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR可溶性CD30配體試劑盒;Progesterone
Verh eff彈力纖維染色液鏈霉 2-酸-5-氟乙脫氫Elisa

根瘤桿屬 2-羧基-5-氟苯基酸甲硫氨酸Elisa

米曲霉 2-氯-3-氟芐溴G蛋白Elisa

薩氏艾美耳球蟲 3-羥基-2-吡啶甲酸鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPA2Elisa

平菇 3-乙氧羰基-4-氟苯基酸磷脂A1Elisa

不解糖鞘氨單胞 3-甲氧羰基-4-氟苯酸磷脂A2Elisa

擴(kuò)展青霉 (S)-四-2-甲酸端粒結(jié)合因子Elisa

斐濟(jì)球腔 (R)-(+)-四-2-羧酸果糖-1,6-二磷酸Elisa

鼠李糖乳桿 2-氨基-4-景天庚酮糖二磷酸Elisa

紅色紅曲 4-溴芐天門冬氨酸Elisa

阿穆爾斯克灣鹽地桿 3-基天冬酰Elisa

柴油食烷 2-氨基-3,5-二氯吡a-亞麻油酸Elisa

金孢霉屬 2-溴-4-氯苯磷酸己糖異構(gòu)Elisa

淺紫灰直絲鏈霉 雷米普利S-腺苷蛋氨酸脫羧Elisa

枯草芽孢桿枯草亞種 2-氯-6-氟苯乙酮羰基化蛋白Elisa