詳細介紹
商品介紹:
用途: 神經(jīng)纖維染色,采用甘氨酸銀浸鍍法,石蠟切片 注意事項: 染色結(jié)果為:神經(jīng)軸突和神經(jīng)纖維成黑色或棕黑色。 儲存條件:4℃,避光,3個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
5×50ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
野牡丹(標準品)英文名稱: Nefopam HCl間質(zhì)衍化因子受體1抗體包裝100ml
野木瓜(標準品)英文名稱: 17-Methyltestosterone神經(jīng)分化因子2抗體包裝25ml
野漆樹苷(標準品)英文名稱: Bumetanide核孔復合體蛋白抗體包裝25g
葉黃; 二羥基-d-胡蘿卜(標準品)英文名稱: Tranexamic acid神經(jīng)性因子ICP34.5(人單純皰疹?、裥停┛贵w包裝5g
葉(標準品)英文名稱: Tranexamic acid背板膠質(zhì)乙酰酯抗體包裝100g
葉下珠(標準品)英文名稱: Proglumide神經(jīng)PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝500g
夜香牛(標準品)英文名稱: GW501516(GSK-516; GW1516)神經(jīng)增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體包裝10g
一點紅(標準品)英文名稱: IbuprofenNOTCH調(diào)節(jié)錨蛋白抗體包裝250g
一葉秋堿 ,一葉萩堿(標準品)英文名稱: Bisacodyl神經(jīng)囊泡膜蛋白1抗體包裝50g
一枝黃花(標準品)英文名稱: Chlorhexidine Acatate突觸生長相關蛋白抗體包裝250ml
伊貝母(新疆貝母)(標準品)英文名稱: CyclopenthiazideNDUFA9蛋白抗體包裝50ml
乙酰丁香酚英文名稱: L-Methyldopa間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝1g
乙酰杠柳寡糖C英文名稱: L-Methyldopa磷化間變性淋巴瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體包裝5g
乙酰哈巴苷(標準品)英文名稱: Mefenamic acid核仁和紡錘體相關蛋白1抗體包裝5g
乙?;邹继J(標準品)英文名稱: Potassium iodide心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體包裝25g
發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus fermentum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒柴胡皂苷D;Saikosaponin D
灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR膠原吡啶交聯(lián)試劑盒柴胡皂苷C;Saikosaponin C
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR降脂試劑盒柴胡皂苷A;Saikosaponin A
改良Palmgren神經(jīng)染色液綠僵 5-氟吡啶-3-甲血管生成2Elisa
芹側(cè)耳(杏鮑菇) 雙環(huán)[2.2.2]辛烷-2,5-二烯-2-羧酸乙酯血管生成受體酪氨酸激1Elisa
解脂亞羅酵母 5-硝基吡唑-3-羧酸乙酯血管性血友病因子Elisa
植物乳桿 3-(4-苯甲酰)酸血紅蛋白Elisa
松衫暗孔 3-酮庚酸甲酯血紅氧合1Elisa
側(cè)孢短芽孢桿 脒鹽酸鹽血肌酐Elisa
短芽孢桿 4-(4-溴苯基)吡啶血漿前激肽釋放Elisa
釀膿鏈球 6-苯基吡啶-2-羧酸血尿Elisa
茄鏈格孢 6-甲基-3-氨基-2-吡啶血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1Elisa
小煤炱屬 3-溴-5-鹽酸鹽血清淀粉樣蛋白AElisa
羊邊蟲(綿羊無漿體—永壽株) 3,5-二-4-甲酸血清鐵Elisa
下彎巴克斯霉 3--4-羥基血清鐵蛋白Elisa
黃綠木霉 2-氨基間苯二甲酸血清總補體Elisa
黃海芽孢桿 3-羥基丁縮二甲血栓A2Elisa
雙孢蘑菇(可訂購) 1-(2-)哌血栓B2Elisa