Van Gieson染色液公司正在出售的產(chǎn)品：caspase-3 p12 subunit /FITC 熒光標(biāo)記活化半胱蛋白蛋白-3抗體IgGFmoc-L-谷氨酰 BR
Cystatin 3/CST3/FITC 熒光標(biāo)記胱抑C/半胱氨蛋白抑制劑C抗體IgGFmoc-D-氨 BR
Caspase-6 (CT)/FITC 熒光標(biāo)記半胱蛋白蛋白-6抗體（C端）IgGFmoc-D-天冬酰 BR
Ca

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

川芎（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3-Phosphoglyceric Phosphokinase白介-10受體β抗體包裝250mg

川芎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP白介-12受體β1抗體包裝1g

川續(xù)斷皂苷VI（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Acidic Protease from Aspergillus 白介-12受體β2抗體包裝25g

川續(xù)斷皂苷乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Prometryn白介15受體α抗體包裝5g

穿山（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sulforaphane白介17受體抗體包裝25g

穿山龍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Mecobalamin白介-17B受體抗體包裝5g

穿心蓮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (S)-Ketoprofen trometamol白介-18受體β鏈抗體包裝1g

穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (S)-Ketoprofen trometamol白介21抗體包裝25g

船形烏頭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Phytagel白介21受體抗體包裝5g

垂盆草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (S)-(+)-Ketoprofen白介-22抗體包裝1g

椿皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： sulfosalicyclic acid白介29抗體包裝25g

慈溪麥冬皂苷A英文名稱： 1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid 白介22受體結(jié)合蛋白抗體包裝5g

次野鳶尾黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine 白介-1受體相關(guān)激4抗體包裝1g

甘草查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： S-Notoginsenoside R2干擾調(diào)節(jié)因子4抗體包裝5g

槐苷英文名稱： Zinc acetate胰島樣生長因子1受體β/IGF-IRβ 抗體包裝1g

粉紅單端孢Trichothecium│roseum 質(zhì)量規(guī)格：≥40%可溶性O(shè)X40L試劑盒花椒;8-Methoxypsoral

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：≥50%,BR可溶性Endoglin試劑盒環(huán)氧澤瀉烯;Alismoxide

Streptococcus castoreus模式菌株: 未知 質(zhì)量規(guī)格：≥90%可溶性CD86試劑盒?？略碥赵?Hecogenin
Van Gieson染色液金針菇（毛柄、冬菇） 3-溴-2-氯重組透明質(zhì)酸Elisa

畫眉草彎孢 1,2,3-苯酸cytb561色Elisa

殼 2-(二氟甲氧基)苯2,3-雙加氧1Elisa

枯草芽胞桿 3-甲酸2,3-雙加氧1Elisa

紫紅曲霉 6,7-二氫-5H-喹啉-8-酮二?；视王；D(zhuǎn)移Elisa

pBlueScript SK(+) 3-氨基-3-(4-甲氧基苯基)酸酮酸Elisa

馬賽屬 L-異亮氨酸乙酯鹽酸鹽谷氨酸Elisa

狹霉鏈霉 1-(4-氨基-3-溴-苯基)-乙酮S-腺苷甲硫氨酸脫羧Elisa

冷溫木拉克酵母 5-溴-2,4-二氯-6-甲基嘧啶黃酮合Elisa

松口蘑 5-羧基-2-金剛烷酮香石竹斑駁病Elisa

大豆慢生根瘤 異丁基氯化鎂香石竹潛隱病Elisa

腸球?qū)?/span> 1,3-二溴金剛烷香石竹壞死斑點(diǎn)病Elisa

泡盛曲霉 2-氯-6-香石竹環(huán)斑病Elisa

泡菜大洋芽胞桿 1-叔丁基-4-氧吡咯烷-2-羧酸磷酸烯式酮酸羧化Elisa

假單胞 5-溴-2-吡甲酸S-腺苷甲硫氨酸Elisa