Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)公司*的產(chǎn)品：Substance P P物質(zhì)抗體納迪克酐 95%
TSFP1/SP1 轉(zhuǎn)錄生長因子SP1抗體硬脂酯 CP,45%（GC）
TPA/PLAT 組織型纖溶原激活劑抗體2-吡啶 98%
SUZ12/CHET9 胚胎干抑制蛋白Suz12抗體二鈉 99%
SP-A 肺表面活性蛋白A抗體錫鈉 CP,53.67% SnO2
SPA

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

狼(狼大戟)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱：  Dacthal顆粒A抗體包裝5g

狼（月腺大戟）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Chlorooctane顆粒D/B/E/N/G/F/H抗體包裝25g

狼乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dodecane粒-巨噬集落激因子3受體抗體包裝5g

老鸛草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bismuth solution血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體包裝1g

老鶴草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper solutionG蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g

老龍皮；網(wǎng)脊衣 A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Copper solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體包裝5g

老蛇蓮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cobalt standard磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝250mg

酪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱：  Chromium StandardG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝1g

雷酚內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Erbium standardG蛋白偶聯(lián)受體15抗體包裝5g

雷公藤春堿英文名稱： Gold solution粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g

雷公藤次堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Iridium standard solution生長停滯特異性蛋白8抗體包裝5g

雷公藤定堿英文名稱： Nickel standardG蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體包裝1g

雷公藤紅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Potassium standard磷脂?；鞍拙厶?5抗體包裝100g

雷公藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Praseodymium standardGADD45γ相互作用蛋白1抗體包裝25g

雷公藤晉堿英文名稱： Tungsten solutionGTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性腎功能衰竭蛋白）包裝5g

紫色小單孢菌Micromonospora│violacea 質(zhì)量規(guī)格：>98%,半合物橋粒糖蛋白2試劑盒米力農(nóng);Milrinone

: ivcas7.00075資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品羥賴糖苷試劑盒馬兜鈴;Aristolone

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>97%,USP grade羥賴試劑盒馬兜鈴B;Aristolochic a
Ca2+鈣離子染色試劑盒(Fluo-3,AM法)自養(yǎng)假諾卡氏 4-硝基-7-哌-2,1,3-苯并惡二唑[用于高效液相色譜標(biāo)記]白介14Elisa

冷海水黃桿 N,N'-二(萘-2-基)-N,N'-二(苯基)聯(lián)苯-4,4'-二程序性死亡配體-1抗體Elisa

野油菜黃單胞棲絨毛致病變種 Fmoc-D-3-(1-萘基)氨酸叉頭框蛋白N3Elisa

紅酵母 溴化釓(III)鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體Elisa

釀酒酵母 1-氯甲酸芴甲酯-(S)-吖丁啶-2-羧酸鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體Elisa

半膠蘑菇(暫定名) 2,4,6-環(huán)庚三烯-1-甲黃色葡萄球的Cas9核酸Elisa

拜耳接合酵母 2,5-二乙酸黃色葡萄球的Cas9核酸抗體Elisa

Promicromonospora Val-Ser環(huán)形交叉軸突導(dǎo)向受體同源物4Elisa

擬香味類香味 4-甲氧基-1-茚酮天冬酰內(nèi)肽Elisa

沙氏芽孢桿 Go 6983TCF4Elisa

姬松茸* 環(huán)氧烯縮二乙正絲氨酸蛋白抑制劑E2Elisa

釀酒酵母 2,2′-[(4，s)-4-苯基-2-噁唑啉]水痘帶狀皰疹病gE抗體Elisa

熱帶假絲酵母 2-己基環(huán)戊酮補(bǔ)體片段4dElisa

樟疫霉 L-乙硫氨酸補(bǔ)體片段4aElisa

檸檬色葡萄球 4-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯集落激因子1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)