商品介紹:
DiOC6(3),是一種膜可透性,綠色熒光的親脂性染料。,低濃度下可選擇性染色活細(xì)胞的線粒體;高濃度下,可以用于染色其他細(xì)胞器內(nèi)膜,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。對于固定的細(xì)胞來說,DiOC6(3)可以染色胞內(nèi)膜。DiOC6(3) (excitation, 484 nm; emission, 501nm) 化學(xué)名稱:DiOC6(3) 分子式:C29H37IN2O2 分子量:572.5CAS:53213-82-4 溶解性:溶于DMSO 儲存:-20℃,避光,有效期一年。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DiOC6(3)碘化物
英文名稱:3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide
產(chǎn)品規(guī)格:10mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
5-羥色鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾英文名稱: Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg
6''-O-二?;玖夏拒沼⑽拿Q: Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g
6''-二沙苑子苷單酯英文名稱: Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名稱: Chondroitin sulfate重組增強型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名稱: Isonicotinic acid雌激受體α抗體(用于western blot)包裝5ml
6,7,4'-三羥基異黃英文名稱: L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿英文名稱: Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運動因子抗體包裝5g
6-氧基山柰酚-3-O-蕓香糖苷英文名稱: Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml
6-姜酚(姜辣)英文名稱: Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g
6-姜烯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g
6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g
6-基異麥冬黃烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g
7,4'-二羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤英文名稱: DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin
瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格:純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin
ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
DiOC6(3)碘化物枯草芽孢桿 2--5-氯吡啶酪氨酸蛋白激受體ErbB4Elisa
奇異鏈霉 (S)-N-芐氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-磷酸化酪氨酸蛋白激受體ErbB2Elisa
芽孢桿屬 1-辛烯-3-乙酸酯磷酸化酪氨酸蛋白激受體ErbB4Elisa
釀酒酵母 吡咯并[2,3-D]嘧啶-4(氫)-酮SMO同系物Elisa
球孢白僵 2,3,5-三氟芐γ分泌Elisa
灰黃淺黃酵母 2,4-二甲基吡咯-3,5-二羧酸乙酯鈣粘連蛋白Elisa
瘡痂病鏈霉 2,3,5-三氟苯乙鎂離子轉(zhuǎn)運蛋白1Elisa
Corynebacterium sp. 4-溴-alpha-苯乙趨化Elisa
薄層屬 1H-吡咯并[2,3-C]吡啶-2-羧酸乙酯膽固-25-羥化Elisa
總狀毛霉 1,1,2-氧基乙烷載脂蛋白MElisa
土壤短芽胞桿 Belleau's試劑法尼酯X受體Elisa
米根霉 -1-乙酸肝三酰甘油脂肪Elisa
頭孢霉 索非那新果糖激Elisa
黑曲霉 2-(苯磺?;?吡啶抗凝血原抗體Elisa
迂回殼囊孢 環(huán)己基肼鹽酸鹽蛋白酪氨酸磷酸Elisa