產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20μL |
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貨號 | GOY-01X9802 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
OPGL/ODF 骨保護蛋白配體抗體(破骨分化因子)N-苯酰-L-精氨酯鹽鹽 98%
OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型蛋白1)人2-溴芴 97%
OPN 骨橋蛋白抗體(分泌型蛋白1)2,2'-聯(lián)喹啉-4,4'-二二鈉 98%
Orexin-A 增
上海谷研實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2022-04-21 15:01:24瀏覽次數(shù):350
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20μL |
---|---|---|---|
貨號 | GOY-01X9802 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
產(chǎn)品屬性:
英文名稱:Hoechst Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100次
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
20μL | 1~3天 |
商品介紹:
ER-Red 染料是細胞滲透性的活細胞染料,對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER) 有高度選擇性;如用手冊提供的方法進行染色,染色圖案在固定后部分保留。該染料含綠色熒光BODIPY:emoji: TR 染料和格列本脲。格列本脲(優(yōu)降糖)能結(jié)合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上突出的ATP-敏感K+ 通道的磺脲類受體上;格列本脲的藥理學活性可能影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能。某些特化細胞中磺脲類受體的可變表達可能導致非內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標記。 濃度:1mM in DMSO 分子式:C44H42BClF2N6O7S2 分子量:915.2316 建議工作濃度:1μM 儲存:-20℃,避光,有效期6個月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-(標...英文名稱: Chitin磷化Ephrin B抗體包裝5g
4'-去鬼臼英文名稱: Coenzyme A, free acid, hydrate (COA)磷化Ephrin B抗體包裝5mg
4'-去氧基表鬼臼(標準品)英文名稱: Paclobutrazol磷化雌激受體α抗體包裝5g
4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羥基呫噸英文名稱: Hydrazine sulfate磷化雌激受體α抗體包裝25g
4-基傘形-β-D-木糖苷英文名稱: Polyphenol Oxidase from Mushrooms表皮生長因子受體底物8抗體包裝1g
4-羥基喹唑啉英文名稱: Copper(II) sulfate, pentahydrate內(nèi)皮1抗體包裝1g
4-硝基兒茶酚(標準品)英文名稱: N-Acetyl-D-glucosamine腸道病71型/手足口病病抗體包裝5g
4’-O-基補骨脂查爾B英文名稱: Manganous sulfate monohydrate絲裂原活化蛋白激1抗體包裝25g
4β-羥基黃芪紫檀烷苷(標準品)英文名稱: Rubidium chloride絲裂原活化蛋白激3抗體包裝5g
5,7,4'-三羥基-8-基二氫黃(標準品)英文名稱: Poly-L-lysine雌激受體α抗體包裝25g
5,7-二羥基色原英文名稱: Span* 80雌激受體β 抗體包裝5g
5-O-基維斯阿米-4'-O-β-D-呋喃芹糖基-...英文名稱: PEG 1000上皮特異性抗原抗體包裝100g
5-O-基維斯阿米苷(標準品)英文名稱: Tryptone內(nèi)皮-1抗體包裝25g
5-羥基糠(標準品)英文名稱: DNSCl, Dansyl chloride天冬蛋白家族蛋白抗體包裝100g
5-羥色(標準品)英文名稱: N-Ethylmaleimide蝮蛇蛇蛋白抗體包裝25g
油污染土鞘菌Sphingobium│olei 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,A型羧化基質(zhì)谷蛋白試劑盒人參炔;Falcarinol,Pana
猴頭菇Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品羧化不全骨鈣試劑盒肉豆寇單甘油酯;Monomyristi
鮑曼/醋鈣復合不動桿菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于培養(yǎng)髓樣分化因子88試劑盒肉豆蔻甘油三酯;Tritetradec
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)紅色熒光探針(ER-Tracker Red)糙孢籃狀 反式-4-氨基環(huán)己抗磷脂酰乙IgM抗體Elisa
嗜中溫寒冷桿 1-氯壬烷基質(zhì)蛋白Del-1Elisa
硬毛栓孔 3,5-二氟-2,6-二胰島受體βElisa
釀酒酵母 1-苯?;?4-酮轉(zhuǎn)化生長因子激1Elisa
產(chǎn)氣列契瓦尼爾氏 (溴甲基)三氟酸鈉氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白1Elisa
葡萄座腔 2-氨基-3-氟-5-氯吡啶轉(zhuǎn)錄因子SOX5Elisa
磚色棲砂桿 5(6)-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞酯肌酸激同工MMElisa
冷溫木拉克酵母 6-硝基-1-茚滿酮肌酸激同工BBElisa
奧氏蜜環(huán) 焦脫鎂葉綠酸-a抑制β-BElisa
菊異莖點霉 4-(2-氯苯氧基)糖蛋白49AElisa
白色金針菇 2-氨基-4-氯-5-硝基吡啶6-磷酸葡萄糖脫氫Elisa
雞傷寒沙門氏 4-氨基-3-氟吡啶乙酰羧化Elisa
深紅沙雷氏 7-甲基糖原合成激3αElisa
尖孢鐮孢 1,3-二溴-3-甲基丁烷磷酸化糖原合成激3αElisa
茶藨子葡萄座腔 雙油酸甘油酯酪氨酸蛋白激受體ErbB2Elisa
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:Hoechst Staining Kit 產(chǎn)品規(guī)格:100次 發(fā)貨周期:1~3天 本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。細胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮。所以Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細胞的細胞核呈正常的藍色,而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發(fā)白。 試劑盒特點: 1. 只需25分鐘即可完成細胞凋亡檢測的整個過程。 2. 本試劑盒提供了固定液,染色液,及抗熒光淬滅封片液。 3. 本試劑盒對貼壁細胞,懸浮細胞和組織切片均適用。 4. 足夠檢測100個樣品。 試劑盒組份: 固定液————————————50ml Hoechst 33258染色液 —————50ml 抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)英文名稱:TGF-β2 ELISA Kit載脂蛋白E4抗體包裝25g
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)英文名稱:TGFβ2 ELISA Kit自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體包裝10mg
轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)英文名稱:TGF-β1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝50mg
轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)英文名稱:TGFβ1 ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體包裝25g
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)英文名稱:TGF-α ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g
轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)英文名稱:TGFα ELISA Kit磷化失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g
主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)英文名稱:MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝5g
主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)英文名稱:MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝25g
主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名稱:MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)英文名稱:TSGF ELISA Kit磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體包裝1g
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)英文名稱:TGSF ELISA Kit磷化活化復制因子2抗體包裝5g
腫瘤壞死因子樣細胞凋亡弱誘導因子(TWEAK)英文名稱:TWEAK ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)英文名稱:TRAIL-R4 ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝25g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)英文名稱:TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗體包裝100g
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)英文名稱:TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗體包裝25g
磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
細胞凋亡染色試劑盒(細胞Hoechst染色)立枯絲核 五-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖1,25二羥基D檢測試劑盒
盤長孢狀盤孢 卡比多巴1,25-二羥基D3檢測試劑盒
紅鬼筆 紫蘇1,3-二磷酸甘油酸檢測試劑盒
伯克霍爾德 鹽酸芬他林1,4,5-三磷酸肌檢測試劑盒
環(huán)圈鏈霉 乙酰甲喹1,5-脫水葡萄糖;1,5-脫水山梨檢測試劑盒
青霉 β-煙酰單核苷酸11去氫血栓烷B2檢測試劑盒
阿舒假囊酵母 氟化鍶11脫氫血栓素B2檢測試劑盒
曲霉屬 香葉木素1-3-β-D葡聚糖檢測試劑盒
解脂假絲酵母 DL-薄荷14-3-3蛋白eta檢測試劑盒
白布勒擔孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧酶檢測試劑盒
白靈側(cè)耳 高良姜素17β-雌二檢測試劑盒
靈芝屬 聚氧烯甘油GP17-羥皮質(zhì)類固檢測試劑盒
黑木耳 單雙甘油脂肪酸脂17羥孕酮檢測試劑盒
美澳型核果褐腐病 7-異氧基異黃酮17-酮皮質(zhì)類固檢測試劑盒
玉米大斑病 槐定堿1α羥化酶檢測試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)