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          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>>Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒

          Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒

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          • Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-21 10:17:35瀏覽次數(shù):189

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20次|100次
          貨號(hào) GOY-01X9542 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Caspase 4 Activity Assay Kit
          Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒公司*的產(chǎn)品:Angiopoietin 1 血管生成素-1抗體2,2-二戊烷 99%
          Angiopoietin 2 血管生成素2抗體9,10-二蒽 分析標(biāo)準(zhǔn)品
          Ankyrin G 錨定蛋白G抗體2,2'-二吡啶 99%
          ANP 心鈉素抗體9,10-二苯蒽 分析標(biāo)準(zhǔn)品
          AT2R 血管緊張素Ⅱ受體抗體3,5-二苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
          Angiotensin I

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒

          英文名稱:Caspase 4 Activity Assay Kit

          產(chǎn)品規(guī)格:20次|100次

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          本試劑盒是采用分光光度法檢測(cè)細(xì)胞或組織裂解液中caspase 4酶活性或純化的caspase 4酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測(cè)或容量不超過(guò)100μl的分光光度檢測(cè)杯檢測(cè)時(shí),除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測(cè)20個(gè)樣品。

          Caspase是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過(guò)程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有時(shí)被寫作caspase-4或caspase 4,可以和Apaf-1相互作用并參與細(xì)胞色素導(dǎo)致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。

          本Caspase 4活性檢測(cè)試劑盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過(guò)測(cè)定吸光度來(lái)檢測(cè)caspase 4的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。

          試劑盒中提供了caspase 4催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 4酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。

          試劑盒組分:

          裂解液——————8ml

          檢測(cè)緩沖液——————8ml

          Ac-LEVD-pNA(2mM)———200μl

          pNA(10mM)——————200μl

          儲(chǔ)存條件:-20℃。

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          通道蛋白0(AQP-0)英文名稱:AQP-0 ELISA Kit早老穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌組件蛋白APH1抗體包裝1g

          雙氫睪(DHT)英文名稱:DHT ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g

          (Leptin)英文名稱:Leptin ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝5g

          (LEP)英文名稱:LEP ELISA KitASH1L蛋白抗體包裝1g

          嗜性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)英文名稱:ECP ELISA Kitα2C-AR腎上腺能受體抗體包裝100g

          嗜性粒細(xì)胞過(guò)氧化物(EPO)英文名稱:EPO ELISA Kit中心體蛋白AZI1抗體包裝25g

          嗜粒細(xì)胞趨化因子(ECF)英文名稱:ECF ELISA Kitα蛋白激3抗體(心?。┌b5g

          嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)英文名稱:Eotaxin 3 ELISA Kit表皮型脂氧合3抗體(魚鱗病相關(guān)蛋白)包裝1g

          嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)英文名稱:Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域28抗體包裝250mg

          嗜粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)英文名稱:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit淋巴相關(guān)AF4樣蛋白抗體包裝5g

          嗜環(huán)蛋白/親環(huán)A(CyPA)英文名稱:CyPA ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體包裝250g

          視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)英文名稱:RBP-4 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體包裝500g

          視黃結(jié)合蛋白(RBP)英文名稱:RBP ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝1G

          生長(zhǎng)抑(SS)英文名稱:SS ELISA Kit錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體包裝250MG

          生長(zhǎng)激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)英文名稱:GHRP-Ghrelin ELISA Kit脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體包裝1g

          特異性錨樣蛋白1抗體血小板因子4(PF4)Otenabant 是一種有效的,選擇性的 cannabinoid receptor CB1 拮抗劑,Ki 值為 0.7 nM,對(duì)其選擇性是對(duì) CB2 的 10
          Caspase 4 活性檢測(cè)試劑盒天藍(lán)色鏈霉 (S)-(-)-N-芐基-α-甲基芐β內(nèi)酰酶檢測(cè)試劑盒

          三葉草根瘤 2-氨基-6-甲氧基苯并噻唑β葡萄糖酸苷酶檢測(cè)試劑盒

          解幾丁質(zhì)纖維單胞 3-苯甲酰烯酸乙酯, 主要為反式β羥丁酸檢測(cè)試劑盒

          尖孢鐮孢 (S)-(+)-1-環(huán)己基乙β-微管蛋白檢測(cè)試劑盒

          多主葡萄殼 鄰三氟乙酮β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1檢測(cè)試劑盒

          豬丹絲 L-亮氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白檢測(cè)試劑盒

          木霉 2-氯-4-羥基吡啶β血小板球蛋白;β血栓環(huán)蛋白檢測(cè)試劑盒

          果生鏈核盤 1-甲基-2-羥甲基-1氫-咪唑γ氨基丁酸檢測(cè)試劑盒

          芽孢桿屬 2-氯-3-溴-5-甲基吡啶γ干擾素檢測(cè)試劑盒

          腸膜明串珠 2-氨基-3-溴-5-甲基吡啶γ干擾素誘導(dǎo)單核因子檢測(cè)試劑盒

          豇豆慢生根瘤 2-氯-5-甲基噻吩γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16檢測(cè)試劑盒

          爪哇擬青霉 2-氯嘧啶γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶檢測(cè)試劑盒

          多量毛霉 N-芐基甘氨酸γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶檢測(cè)試劑盒

          孟氏假單胞 4-乙氧基-1,1,1-三氟-3--2-酮γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒

          長(zhǎng)雙歧桿 1-溴-2,6-二甲氧基苯δ氨基乙酰酸脫水酶檢測(cè)試劑盒 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

           


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