以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Chebulagic acid是一個從果實(shí)中提取出來的COX-LOX雙重抑制劑。有抗炎和抗感染的效果。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:23094-71-5 純度:98.19% 分子量:954.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
根瘤菌19號染色體開放閱讀框42抗體Human ATG4B ELISA Kit人組織蛋白C(CTSC)免疫試劑盒
膠凍樣芽胞桿菌19號染色體開放閱讀框44抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒
釀酒酵母19號染色體開放閱讀框48抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白乙酰化(HAT)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌19號染色體開放閱讀框50抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人組蛋白脫乙酰化2(HDAC2)免疫試劑盒
長枝木霉19號染色體開放閱讀框51抗體Human ATIC ELISA Kit人組蛋白去乙?;?(HDAC3)免疫試劑盒
硬水黃桿菌19號染色體開放閱讀框52抗體Human ARP2 ELISA Kit人組蛋白去乙?;?HDAC)免疫試劑盒
Bacillus anthracis19號染色體開放閱讀框55抗體Human ATR ELISA Kit人組蛋白賴N-甲基轉(zhuǎn)移SETD7(SETD7)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌19號染色體開放閱讀框56抗體Human ATG4B ELISA Kit人組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒
四川散斑殼19號染色體開放閱讀框57抗體Human BBS8 ELISA Kit人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
玉蕈離褶傘19號染色體開放閱讀框61抗體Human ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA Kit人組(HIS)免疫試劑盒
黑曲霉19號染色體開放閱讀框77抗體Human ATIC ELISA Kit人足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒
產(chǎn)棒桿菌核DNA結(jié)合蛋白C1D抗體Human ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA Kit人總蛋白S(TPS)免疫試劑盒
奧氏蜜環(huán)菌1號染色體開放閱讀框58抗體Human ARP2 ELISA Kit人總蛋白C(TPC)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌21號染色體開放閱讀框66抗體Human AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA Kit人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白2(NRAMP-2)免疫試劑盒
嗜低鹽適鹽菌CDC42效應(yīng)蛋白3抗體Human ATR ELISA Kit人自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種7號染色體開放閱讀框43抗體Human ARP3 ELISA Kit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒
魯酵母Saccharomyces│rouxii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-乙酰-β-D-基葡萄糖苷試劑盒柯諾辛
: Le-114,廣東微生物所46資源名稱: 香菇 質(zhì)量規(guī)格:BRN-基-D-天冬受體試劑盒奎寧
樹狀假絲酵母Candida│arborea 質(zhì)量規(guī)格:BRN鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白試劑盒苦馬豆
COX-LOX雙重抑制劑(Chebulagic acid)替加英文名稱: Naphthalene-1,5-disulfonic acid disodium salt前列腺EP1受體抗體包裝500g
替拉扎明英文名稱: Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate脯解4抗體包裝1g
替諾昔康英文名稱: Naphthol AS acetate性核磷蛋白32家族B抗體包裝100g
咯英文名稱: NCS, N-Chlorosuccinimide程序性死亡2樣抗體包裝25g
咯丁三英文名稱: n-Dodecyl-b-D-thiomaltoside豬藍(lán)耳病病M蛋白抗體包裝100g
洛芬英文名稱: NDSB 256蛋白體PSMα3抗體包裝25g
色林,凱他色林英文名稱: NDSB-211蛋白體PRS10B抗體包裝5g
托吡酯英文名稱: Neutral red solution(1X)蛋白體PSMD3抗體包裝5MG
托伐普坦英文名稱: Nickel powder腦蛋白4抗體包裝1g
托拉塞米英文名稱: Nile blue A磷化蛋白體PSMα3抗體包裝100g
托萘酯英文名稱: N-Iodosuccinimide抑癌蛋白DLP1包裝25g
托曲珠利;妥曲珠利英文名稱: N-N-Dimethylglycine hydrochloride蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移1抗體包裝500g
脫羧雷他定/地雷他定英文名稱: n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激1β/CaMKIβ抗體包裝2g
英文名稱: n-Octyl-b-D-maltopyranoside激-M2抗體包裝25g
維拉佐英文名稱: Nonyl β-D-glucopyranoside原鈣粘蛋白β7抗體包裝5g