商品介紹:
ML-030是一種有效的PDE4抑制劑,對PDE4A,PDE4A1,PDE4B1,PDE4B2,PDE4C1和PDE4D2的IC50值分別為6.7nM,12.9nM,48.2nM,37.2nM,452nM和49.2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1013750-77-0 純度:99.32% 分子量:412.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PDE4抑制劑(ML-030) | ML-030 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
布氏乳桿菌補體C6抗體Human C5AR1(C5a anaphylatoxin chemotactic receptor 1) ELISA Kit人ELISA Kit
黑木耳癌胚抗原相關(guān)粘附分子7抗體Human CA8 (Carbonic anhydrase-related protein) ELISA Kit人左右不對稱發(fā)育因子2(LEFTY2)免疫試劑盒
豬丹絲菌磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體Human BRIP1 (Fanconi anemia group J protein) ELISA Kit人左旋肉堿/L-肉堿 免疫試劑盒
干燥棒桿菌*磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體Human CABC1 (Atypical kinase COQ8A) ELISA Kit人組織因子途徑抑制物-2(TFPI-2)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPδ抗體Human ASTL(Astacin-like metalloendopeptidase) ELISA Kit人組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
青紫鏈霉菌轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體Human BAP31 ELISA Kit人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)免疫試劑盒
黑荊樹根瘤菌磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε抗體Human BCAT1/ECA39 ELISA Kit人組織多肽特異性抗原(TPS)免疫試劑盒
根瘤菌腦血管內(nèi)皮粘附分子1抗體Human BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA Kit人組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
藏紅深黃孔菌補體C1QL4鏈多肽抗體Human BCL2L10 ELISA Kit人組織蛋白去乙?;?HD)免疫試劑盒
中華根霉19號染色體開放閱讀框2抗體Human BCL6(B-cell lymphoma 6 protein) ELISA Kit人組織蛋白S(CTSS)免疫試劑盒
蜂蜜接合酵母卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體Human C14orf28 (Dopamine receptor-interacting protein 1) ELISA Kit人組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)免疫試劑盒
產(chǎn)溶桿菌產(chǎn)亞種卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體Human C1orf116 (Specifically androgen-regulated gene protein) ELISA Kit人組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
草燕麥鐮孢卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體Human BMSC UbP ELISA Kit人組織蛋白H(CTSH)免疫試劑盒
*紅城紅球菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體Human B-Myb ELISA Kit人組織蛋白G自身抗體(Cath G Ab)免疫試劑盒
相思根瘤菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體Human C1orf57 (Cancer-related nucleoside-triphosphatase) ELISA Kit人組織蛋白G(cath-G)免疫試劑盒
釀酒酵母19號染色體開放閱讀框25抗體Human C4 (alpha chain) ELISA Kit人組織蛋白D(cath-D)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeP0蛋白抗體試劑盒卡枯
短桿菌Brevibacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BS GradeOJ抗體/抗異亮酰tRNA合成抗體試劑盒柯伊利-7-O-葡萄糖苷
豬丹毒絲菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind GradeN-乙?;?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯試劑盒柯諾辛B
PDE4抑制劑(ML-030)色英文名稱: Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate磷化PDZ連接激/T-LAK源蛋白激抗體包裝5g
沙利度(反應(yīng)停)英文名稱: Melezitose monohydrate磷化3磷肌依賴性蛋白激1包裝10g
英文名稱: Mepiquat chloride星形膠質(zhì)PEA15抗體包裝1g
舒林英文名稱: Metaphosphoric acid轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體包裝500mg
舒洛芬英文名稱: Methyl cinnamate蛋白磷2A抑制劑1抗體包裝100g
雙芬英文名稱: Methyl dihydrojasmonate橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體包裝25g
雙芬鈉英文名稱: Methyl indole-4-carboxylate抑癌蛋白DLP1抗體包裝5g
雙楊酯;楊-2-羧基酯英文名稱: Methylene green zinc chloride double salt蛋白激C delta結(jié)合蛋白抗體包裝1g
順磺阿曲庫銨英文名稱: Methylene violet 3RAX鴨型肝炎病聚蛋白抗體包裝1mg
蘇拉明鈉英文名稱: Methylsuccinic acid前列腺E2抗體包裝1g
索非那新琥珀鹽英文名稱: MH, maleic hydrazide多效生長因子抗體包裝5g
他扎羅汀英文名稱: Molybdenium powder轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體包裝100g
碳司維拉姆英文名稱: Molybdenium(IV) sulfide凋亡相關(guān)蛋白6抗體包裝25g
特非那定英文名稱: NAA-Na, 1-naphthaleneacetic acid sodium saltPSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ抗體包裝100g
特立英文名稱: N-Acetyl-DL-valine血小板源性生長因子AA+BB抗體包裝25g