產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PPAR-γ激動(dòng)劑(Rosiglitazone)
英文名稱:Rosiglitazone
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|50mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Rosiglitazone是一種過氧化物酶體增殖物激活受體-gamma(PPAR-γ)激動(dòng)劑,是TRPM2和TRPM3通道阻斷劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):122320-73-4 別名:BRL49653 純度:99.46% 分子量:357.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
淡天藍(lán)鏈霉菌FAM50C蛋白抗體Human DCPS (m7GpppX diphosphatase) ELISA KIT牛生長激釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒
異常畢赤酵母FAM91A1蛋白抗體Human CYP4F2 (Phylloquinone omega-hydroxylase CYP4F2) ELISA KIT牛生長激(GH)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌FRMD1蛋白抗體Human DCAF12L1 (DDB1- and CUL4-associated factor 12-like protein 1) ELISA KIT牛腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒
溶桿菌髓鞘缺陷相關(guān)蛋白抗體Human CMPK1 (UMP-CMP kinase) ELISA KIT牛腎上腺(EPI)免疫試劑盒
龜裂鏈霉菌叉頭蛋白B1+B2抗體Human DCST1 (DC-STAMP domain-containing protein 1) ELISA KIT牛神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒
孔曲霉叉頭蛋白G1抗體Human CYBRD1 (Cytochrome b reductase 1) ELISA KIT牛神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種腫瘤/抗原112抗體Human DDHD1 (Phospholipase DDHD1) ELISA KIT牛狀腺原(T3)免疫試劑盒
炭黑曲霉微管動(dòng)力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體Human CCNYL1 (Cyclin-Y-like protein 1) ELISA KIT牛軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌FAM50B蛋白抗體Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)免疫試劑盒
弗氏檸檬菌形成2抗體(成蛋白)Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT牛乳脫氫(LDH)免疫試劑盒
解脂復(fù)膜孢酵母(亞羅解脂酵母)脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human CDK16 (Cyclin-dependent kinase 16) ELISA KIT牛乳過氧化物(LPO)免疫試劑盒
鮑魚菇成纖維生長因子17抗體Human CAND1 (Cullin-associated NEDD8-dissociated protein 1) ELISA KIT牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移-II(CPT-II)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉成纖維生長因子23抗體Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT牛肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移-Ⅰ(CPT-Ⅰ)免疫試劑盒
豬丹絲菌成纖維生長因子20抗體Human CWF19L1 (CWF19-like protein 1) ELISA KIT牛肉堿免疫試劑盒
玉米大斑病菌成纖維生長因子19抗體Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT牛溶菌(LZM)免疫試劑盒
厚垣孢普可尼亞菌成纖維生長因子22抗體Human CLMP (CXADR-like membrane protein) ELISA KIT牛特異性蛋白B(PSPB)免疫試劑盒
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)煙
東京根霉Rhizopus│tonkinensis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)熊去氧膽
: GIMSCAU1.033資源名稱: 稻腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)新補(bǔ)骨脂異黃
PPAR-γ激動(dòng)劑(Rosiglitazone)諾沙星鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Prasugrel腫瘤壞死因子配體超家族成員10C包裝250mg
諾卡英文名稱: Clonidine hydrochloride 干擾誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體包裝5g
帕米磷二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clonidine hydrochloride 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體包裝100g
帕米膦二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Methoxyestradiol穿膜蛋白DLK1抗體包裝1g
帕潘立(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-MethoxyestradiolDysferlin蛋白抗體包裝25g
拉西林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Methoxyestradiol防御β2/Defensin β2抗體包裝5g
拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenformin hydrochloride死亡相關(guān)蛋白5抗體包裝1mg
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Phenformin hydrochloride解旋DEAD5抗體包裝25g
派可林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefoperazone sodium間粘附分子非整合蛋白3抗體包裝100g
泮托拉唑鈉1.5合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefoperazone sodiumCaspase 激活的脫氧核糖核抗體包裝500g
泮托拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Benzylglycine死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g
培哚普利叔丁鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zanamivir死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝100ml
培哚普利雜質(zhì)S9780(培哚普利拉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ZanamivirDNA聚合β抗體包裝500ml
培美曲塞二鈉D-異構(gòu)體(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine死亡相關(guān)蛋白6/Fas死亡區(qū)相關(guān)蛋白抗體包裝1g
培美曲塞二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methazolamide動(dòng)力蛋白2抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)