詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:髓鞘染色液(麗春紅G法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 麗春紅G和亮綠SF聯(lián)合染色法 注意事項: 染色結果為:髓鞘呈紅色,軸索、神經(jīng)束衣和神經(jīng)內衣呈綠色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
羊耳菊(標準品)英文名稱: Sulfanilamide谷受體2C抗體(N端)包裝5g
羊開口(標準品)英文名稱: Sulfamethazine癌/抗原58抗體包裝25g
羊奶奶葉(標準品)英文名稱: Sulfamethazine非霍奇金淋巴瘤重復蛋白3抗體包裝5g
楊梅苷(標準品)英文名稱: Saccharin增殖相關核仁抗原抗體包裝100g
楊梅-3-O-半乳糖苷英文名稱: PhenolphthaleinNALP12抗體包裝25g
楊梅/楊梅(標準品)英文名稱: Salicylic acid富含亮重復結構域蛋白6抗體包裝5g
楊芽黃(標準品)英文名稱: Propacetamol HCl富含亮重復結構域蛋白7抗體包裝100g
洋艾(標準品)英文名稱: Propacetamol HCl富含亮重復結構域蛋白9抗體包裝25g
洋川芎內酯A(標準品)英文名稱: Naphazoline hydrochloride富含亮重復結構域蛋白10抗體包裝5g
洋川芎內酯H(標準品)英文名稱: POLYETHYLENE GLYCOL MONO-4-NONYLPHENYL ETHER鈉鈣交換蛋白2抗體包裝1g
洋川芎內酯I(標準品)英文名稱: 4,4'-Diaminodiphenylsulfone抑癌基因NDRG2抗體包裝5g
洋薊;1,5-二咖啡??鼘?標準品)英文名稱: DimenhydrinateDNA損傷關卡蛋白1抗體包裝1g
氧代川南亭堿(標準品)英文名稱: Prednisolone acetate伴肌動蛋白抗體包裝5g
氧化白藜蘆(標準品)英文名稱: xx抑癌基因NDRG4抗體包裝250mg
氧化白藜蘆-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱: DanazolNK受體2A抗體包裝1g
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質量規(guī)格:930u/mg,進分結締組織活化肽Ⅲ試劑盒橙黃Ⅱ;Orange Ⅱ
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:HPLC>98%,分析標準品結蛋白試劑盒橙黃Ⅰ;Orange I
雞痘病毒Avipoxvirus│Fowlpox virus 質量規(guī)格:>98%,BR結蛋白試劑盒α-常春藤皂苷;A-Hederin
髓鞘染色液(麗春紅G法)異常漢遜酵母異常變種 2,3-二基酸乙酯腺苷脫氨Elisa
白金針14 4-甲氧基鹽酸鹽消退D1Elisa
異常漢遜酵母 2--5-基異酸酯硝基酪氨酸Elisa
相思根瘤 5-硝基噻吩-3-羧酸小膠質特異性標志物Elisa
蘇云金芽胞桿 4-咪唑心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
雞傷寒沙門氏 4'-氟-2-羥基苯乙酮心肌特異性肌鈣蛋白TElisa
腐皮殼 B-2-二苯并呋喃基酸心鈉Elisa
棉子糖乳球 1-溴乙基乙酸酯鋅-α2糖蛋白Elisa
產(chǎn)酸克雷伯氏 三(2-烯酰氧乙基)異脲酸酯(含穩(wěn)定劑吩噻)鋅原卟啉Elisa
紫色紅曲 3--4-硝基三氟甲苯新飽食分子蛋白1Elisa
玉米黑粉 2-甲基-4-羧基吡啶信號傳導子及轉錄激活子6Elisa
釀酒酵母 四氫吡喃-4-甲酰信號3AElisa
鐮刀屬 五氟化(4-苯基)硫信號轉導分子7Elisa
枯草芽孢桿 5-乙?;?2-羥基苯甲酰性結合球蛋白Elisa
杏鮑菇 2,4-二-5-異氧基苯肼胸腺基質生成Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)