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詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
產品屬性：
中文名稱：Hoechst33342染色試劑盒
英文名稱：
產品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
Hoechst33342染色試劑盒可用于細胞凋亡檢測，也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。Hoechst33342 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。Hoechst 33342 能少許進入正常細胞膜，使其染上低藍色，而凋亡細胞的膜通透性增強，因此進入凋亡細胞中的Hoechst 33342 比正常細胞的多，熒光強度要比正常細胞中要高，此外，凋亡細胞的染色體DNA的結構發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結合，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將Hoechst 33342 排出到細胞外使之在細胞內積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。Hoechst 33342的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33342和雙鏈DNA 結合后，大激發(fā)波長為350nm，大發(fā)射波長為461nm。 本Hoechst 33342染色試劑盒可直接用于活細胞或組織的細胞核染色，也可用于固定細胞或組織的細胞核染色。 儲存條件：HO33342液-20℃避光保存。B液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
乙阿比特龍酯英文名稱： Dorzolamide HCl富含半胱C端蛋白1抗體包裝5g
異環(huán)磷酰英文名稱： Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗體包裝1g
扎西他濱,2',3'-二脫氧胞苷英文名稱： Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗體包裝5g
子囊霉英文名稱： Doxorubicin HCl/Adriamycin19號染色體開放閱讀框29抗體包裝1g
紫杉英文名稱： Doxorubicin HCl/Adriamycin磷化p21蛋白抗體包裝250mg
左亞葉鈣；酰四氫葉鈣英文名稱： Doxycycline HCl磷化周期檢測點激2抗體包裝25g
阿卡地新(AICAR)英文名稱： Doxycycline HCl磷化鈣/鈣調依賴蛋白激2α抗體包裝5g
阿利克侖半富馬鹽英文名稱： Menadione磷化周期依賴性激2抗體包裝100g
阿齊沙坦英文名稱： Menadione磷化周期檢測點激1抗體包裝25g
阿昔莫司，阿西莫司英文名稱： Econazole nitrate磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g
英文名稱： Econazole nitrate磷化α-連環(huán)蛋白抗體包裝5g
安倍生坦英文名稱： Entecavir周期E2抗體包裝5g
力農英文名稱： Entecavir磷化鈣/鈣調依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體包裝250mg
地平英文名稱： Epalrestat 腫瘤易感候選基因3抗體包裝100g
奧美沙坦；奧美沙坦英文名稱： Epirubicin HCl磷化腫瘤易感候選基因3抗體包裝25g
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質量規(guī)格：>98%,BR胰島淀粉樣多肽試劑盒鹽堿;Ephedrine hydr
CBS7227=IFO10179資源名稱: 假白布勒酵母 質量規(guī)格：>95%脂溶性的原激活肽試劑盒原人參三;Protopanaxatri
棲熱菌Thermus│sp. 質量規(guī)格：≥98%,BR原Ⅱ試劑盒原人參二;Protopanaxdiol
Hoechst33342染色試劑盒中國克魯維酵母 6-氯水楊酸重組人脂肪因子Elisa
黃色短桿 N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙?；鶜ち浅衫w維生長因子13Elisa
猴頭 制霉藥敏紙片補體C5轉化Elisa
金黃殼囊孢 氨芐青霉藥敏紙片特異性IgG抗體Elisa
貝雷絲孢酵母 異鋁KI67抗原Elisa
球孢白僵 丁香連氮β肌動蛋白Elisa
總狀毛霉 大孔樹脂XDA-1β肌動蛋白Elisa
沼澤紅假單胞 D-腺病抗體Elisa
大腸埃希氏 愈創(chuàng)木酚支原體Elisa
溶桿 鄰苯二甲酸核因子κB抑制物激Elisa
串珠鐮刀 羊毛脂總膽固Elisa
氧化微桿 雙氯酚 白介13Elisa
核青霉 高效氯氟菊酯凝血Elisa
類芽孢桿 環(huán)沙星FAT4Elisa
明尼蘇達被毛孢 鄰苯二甲酸二癸酯高分子量脂聯(lián)Elisa
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