詳細介紹
商品介紹:
本產(chǎn)品主要適用于動物原生代或培養(yǎng)細胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。廣泛用于骨細胞或組織病理生理的研究。 茜素紅S 是一種蒽醌衍生物:9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸單鈉鹽,又稱媒介紅3(Mordant Red3)或茜素磺酸鈉。其分子式為C14H7NaO7S,分子量為342.25。茜素紅和鈣離子以鰲和方式形成復合物,用以識別組織細胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標志之一。通過茜紅素染色,產(chǎn)生桔紅色沉積,但會受到其它金屬元素的干擾。 注意: 1.臨用前將茜素紅染色液B 以超純水稀釋十倍,待用(通風櫥內(nèi)操作)。 2.將9mL 茜素紅S 染色液A 與1mL 稀釋后的茜素紅染色液B *混合,即得到1%的茜素紅S 染色工作液,pH6.3 左右。制備好的染色工作液在2-8℃,避光條件下可保存1 月。 3.以6 孔板為例,每孔孵育的染色工作液為500μL,本試劑盒可以做20tests;以普通切片和96 孔細胞為例,每張玻片孵育的染色工作液為100μL,本試劑盒可以做100tests。 儲存:2~8℃,有效期3個月。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:茜素紅染色液(ph4.2)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
右佐匹克(標準品)英文名稱: (R)-(?)-Mandelic acid雌激受體α抗體包裝250mg
魚腥草鈉(標準品)英文名稱: 1-Aminohydantoin Hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關結(jié)合蛋白抗體包裝1g
愈創(chuàng)甘油(標準品)英文名稱: 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g
愈創(chuàng)木酚磺(標準品)英文名稱: ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g
遠華蟾蜍精(標準品)英文名稱: Bradykinin雌激硫轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
月桂(標準品)英文名稱: Bradykinin acetateE Tag標簽抗體包裝5g
孕三烯(標準品)英文名稱: α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g
扎來普(標準品)英文名稱: Endothelin-1, human,porcine食道癌相關基因抗體包裝5g
扎那米韋(標準品)英文名稱: BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g
扎托布洛芬(標準品)英文名稱: VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質(zhì)谷運載蛋白1抗體包裝1g
正己(標準品)英文名稱: Agarose轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝5g
正十九烷(標準品)英文名稱: PEG 400內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體包裝1mg
正十五烷(標準品)英文名稱: Cholestyramine resin外基質(zhì)蛋白1抗體包裝5mg
芝麻酚(標準品)英文名稱: Sucrose外胚層發(fā)育不良抗體包裝25g
酯蟾配基;蟾力蘇(標準品)英文名稱: D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標簽抗體包裝5g
伊尼奧小單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品糖化血紅蛋白A1c試劑盒3,4,5-三氧基酯;Meth
卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR糖化低密度脂蛋白試劑盒石杉堿;(-)-Huperzine A
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品糖化白蛋白試劑盒楊酯;Birch-Me
茜素紅染色液(ph4.2)朱黃籃狀 FMOC-D-1,2,3,4-四氫-Β-咔啉-3-羧酸β2巨球蛋白Elisa
Paenibacillus durus 2,3,7,8,12,13,17,18-八乙基-21H,23H-卟吩α-烯化Elisa
解脂假絲酵母 3-氨基-2,2-二甲基-1-(草酸鹽形式)α-烯化Elisa
加德納 8-苯基辛酸胸腺表達趨化因子Elisa
長蠕孢 N-(4-溴苯基)硫脲再生胰島衍生蛋白4Elisa
褐囊蜜環(huán) N-3-異惡唑氨酸叔丁酯p物質(zhì)前提Elisa
野土地桿 5-溴-2-呋喃甲酰肼EB病包膜糖蛋白gp350抗體Elisa
釀酒酵母 4-硝基馬尿酸MG29抗體Elisa
不產(chǎn)色鏈霉不產(chǎn)色亞種 4-氨基鄰甲酚組釋放因子Elisa
釀酒酵母 2-溴-1,3-二氯-5-氟苯磷酸化肝生長因子受體Elisa
噬果膠黃桿 3--1,2,3-三羧酸map2k5Elisa
地衣芽孢桿 3-氧雜環(huán)丁烷支原體IgG抗體Elisa
康寧木霉 3-二氟甲氧基衣原體抗體IgGElisa
相思根瘤 4-甲氧基-2-乙肺炎支原體IgM抗體Elisa
膨端青霉 2,4-二羥基-3-硝基吡啶肌抗體Elisa