以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
異檸檬酸脫氫酶(IDH1)抑制劑 | (R,S)-Ivosidenib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
(R,S)-Ivosidenib是一種異檸檬酸脫氫酶(IDH1)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 別名:(R,S)-AG-120 純度:99.40% 分子式:C??H??ClF?N?O? 分子量:582.96 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
放射形根瘤菌MD-1蛋白抗體Human PLA2G4B ELISA Kit纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA Kit
炭疽芽胞桿菌MD-2蛋白抗體Human PLA2G4E ELISA Kit纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA Kit
短芽孢桿菌淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體Human PLA2G4F ELISA Kit纖溶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA Kit
小孢根霉寡孢變種肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纖溶原激活劑(PLGA)ELISA Kit
谷棒桿菌Ⅰ型熒光抗體Human PLAC1L ELISA Kit纖溶原(Plg)ELISA Kit
反卷毛殼亮基肽3抗體Human PLAGL2 ELISA Kit纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)ELISA Kit
耳匙菌肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human PKMYT1 ELISA Kit纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)ELISA Kit
耐寒短桿菌腫瘤抑制基因LPP2抗體Human MAGEC1(Melanoma-associated antigen C1) ELISA Kit纖連蛋白(FN)ELISA Kit
異常漢遜酵母腫瘤抑制基因LATS1抗體Human PITX1 ELISA Kit細(xì)菌性病(BV)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌磷化單絲蛋白激1/2抗體Human PITX2 ELISA Kit周期D3(Cyclin-D3)ELISA Kit
芥黃蜜環(huán)菌磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體Human PIWIL2 ELISA Kit周期D2(Cyclin-D2)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種磷化絲/蘇蛋白激抗體Human PIWIL1 ELISA Kit周期D1(Cyclin-D1)ELISA Kit
貝萊斯芽胞桿菌磷化絲/蘇蛋白激抗體Human PKC iota ELISA Kit周期A2(Cyclin-A2)ELISA Kit
圍小叢殼菌磷化絲/蘇蛋白激抗體Human HDL(High-density lipoprotein) ELISA Kit周期蛋白依賴性激2(CDK2)ELISA Kit
鐮孢霉黃體激釋放激類似物抗體Human PJA1 ELISA Kit周期蛋白A1(CCNA1)ELISA Kit
Winogradskyella pulchriflava 磷化核纖層蛋白A/C抗體Human PKIG ELISA Kit因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA Kit
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)棗仁皂苷A
: =CGMCC1.1969=ATCC33653資源名稱: 最小弧菌 質(zhì)量規(guī)格:化學(xué)發(fā)光試劑三七皂苷R1
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含氮量:9.00-10.30 %連翹苷
異檸檬酸脫氫酶(IDH1)抑制劑CK19 角蛋白19抗體N-芐氧羰-L-色氨 98%
CK20 角蛋白20抗體氟 99.99% metals basis
CK1/8/19 角蛋白1/8/19抗體氟 AR,40.0%
CK2 角蛋白2抗體葡萄糖,一水 98%
CK3 角蛋白3抗體葡萄糖,一水 USP,藥用級
CK4 角蛋白4抗體玉米淀粉 藥用級
CK5 角蛋白5抗體三溴化 99.999%
CK7 角蛋白7抗體三溴化 99.9%