技術(shù)文章
大鼠apelin 12(AP12)elisa試劑盒操作步驟
閱讀:104 發(fā)布時間:2023-5-10大鼠apelin 12(AP12)elisa試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白4抗體ICAM-3/CD50 ELISA Kit
肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體ICAM-2/CD102 ELISA Kit
高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體ICAM-1/CD54 ELISA Kit
乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體ICAM-1 ELISA Kit
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白1、2、3、4抗體CTLA-4/CD152 ELISA Kit
去整合素樣金屬蛋白酶12CagA ELISA Kit
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體CTX ELISA Kit
膜粘連蛋白2受體抗體IAP ELISA Kit
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體PYCARD ELISA Kit
ADCK5蛋白抗體SLE ELISA Kit
艾滋病病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體NSE ELISA Kit
AFP4b蛋白抗體SELENBP1 ELISA Kit
HIV-1病毒復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體SELS ELISA Kit
伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體SEPP1 ELISA Kit
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體SEP1 ELISA Kit
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Pentosidine ELISA Kit
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體HIP1 ELISA Kit
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體PTX3 ELISA Kit
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體FCN2 ELISA Kit
雌二醇抗體ACO-2 ELISA Kit