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裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒?操作步驟:
閱讀：146 發(fā)布時(shí)間：2022-2-24裸鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
ATG9B自噬相關(guān)蛋白9B抗體
Apg12自噬相關(guān)蛋白12抗體
ATG13自噬相關(guān)蛋白13抗體
ATG3自噬相關(guān)蛋白3抗體
ADAMTS4整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶4型抗體
phospho-ATF2 (Ser490/498)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757)磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體
ACTR絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶ATR抗體
ADAM18去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
ATF6活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體
AP2 beta銜接蛋白β抗體
Gamma-Adaptin銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體
AQP9水通道蛋白-9抗體
Annexin A3膜粘連蛋白A3抗體
Annexin IV膜粘連蛋白 A4抗體
APG8A自噬相關(guān)蛋白8A抗體
phospho-Akt (Thr450)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AMPK alpha-1 (Thr198)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
phospho-Akt(Thr308)磷酸化蛋白激酶B抗體
APOBEC3G脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
AKAP13蛋白激酶錨定蛋白13抗體