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          對(duì)蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ┕?yīng)

          閱讀:463          發(fā)布時(shí)間:2020-3-26

          對(duì)蝦血細(xì)胞虹彩病毒(SHIV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/strong>操作方法:

          一、樣品 RNA 的制備

          1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout

          2、或柱式病毒 RNAout。

          二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA

          1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)

          2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

          3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

          反應(yīng)終體積為 20μL。

          4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。

          5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

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