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馬勃LAMP鑒定試劑盒實(shí)驗(yàn)使用步驟
閱讀:295 發(fā)布時(shí)間:2020-3-25馬勃LAMP鑒定試劑盒使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
1. 用自選方法純化 N+2 個(gè)樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網(wǎng)站訂購核酸釋放劑。
2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要做 N+2 個(gè)提取,包括一個(gè)樣品制備陽性對(duì)照和一個(gè)樣品制備陰性對(duì)照。樣品制備陽性對(duì)照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 馬勃 LAMP 陽性對(duì)照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對(duì)照是直接用水。提取結(jié)束后后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40μL 體系)
3. 對(duì) N+2 個(gè)樣品,在 PCR 時(shí)需要增加一個(gè) PCR 陽性對(duì)照和一個(gè) PCR 陰性對(duì)照,故需要設(shè)置 N+4 個(gè)反應(yīng)。
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增馬勃,與其他植物沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。