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讓轉(zhuǎn)化細(xì)胞快樂(lè)的十個(gè)訣竅
閱讀：472 發(fā)布時(shí)間：2018-6-12轉(zhuǎn)化細(xì)胞可是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞長(zhǎng)不好，那么實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也不會(huì)好到哪兒去。在此我公司技術(shù)人員介紹了讓細(xì)胞快樂(lè)的十個(gè)訣竅。細(xì)胞可是許多生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的主角。在此介紹了讓細(xì)胞快樂(lè)的十個(gè)訣竅。
1. 確保所有實(shí)驗(yàn)室材料都無(wú)菌 交叉污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。即使是zui輕微的污染，也可能毀了幾個(gè)星期的成果。因培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖潮濕，真菌極易生長(zhǎng)，因此必須注意定期清潔。此外，在將培養(yǎng)瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前，應(yīng)用酒精擦拭干凈，以避免污染。 2. 小心處理您的培養(yǎng)物 細(xì)胞培養(yǎng)的脆弱性怎么強(qiáng)調(diào)也不為過(guò)。劇烈搖晃，或連續(xù)的溫度波動(dòng)可能會(huì)對(duì)生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。確保培養(yǎng)箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外，盡量避免一次處理多個(gè)細(xì)胞系，因?yàn)樗赡軙?huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。您還應(yīng)定期完成STR圖譜分析，以確認(rèn)細(xì)胞系的身份。
3. 在使用前正確解凍細(xì)胞 盡管解凍看起來(lái)是個(gè)簡(jiǎn)單的步驟，但必須操作得當(dāng)，以免傷害細(xì)胞。長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無(wú)法鋪板。因此，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養(yǎng)基稀釋?zhuān)员苊釪MSO造成直接傷害。
4. 使用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程共有3個(gè)階段：停滯期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期，分別代表了低細(xì)胞生長(zhǎng)、高細(xì)胞生長(zhǎng)和無(wú)細(xì)胞生長(zhǎng)。zui有活力的細(xì)胞是健康的，快速分裂的，在對(duì)數(shù)期以70-80%的匯合度存在。
5. 在傳代之前不要讓轉(zhuǎn)化細(xì)胞*匯合 匯合度是指貼壁細(xì)胞占據(jù)培養(yǎng)瓶表面積的比例。*匯合意味著100%的表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要避免這種狀態(tài)，因?yàn)樗馕吨?xì)胞不能繼續(xù)生長(zhǎng)。不過(guò)，當(dāng)務(wù)之急是使用活躍生長(zhǎng)的細(xì)胞。
250 mCPC Medium 用于弧菌分離培養(yǎng)(FDA標(biāo)準(zhǔn)) mCPC 培養(yǎng)基
1000ml Vibrio Chromogenic Medium 用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍(lán)色，其它弧菌顯無(wú)色。 弧菌顯色培養(yǎng)基
100 DNase Agar 用于核糖核酸酶檢測(cè) DNA酶瓊脂
100克 Toluidine Blue-O-Dnase Agar 用于核糖核酸酶測(cè)定 甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂
250 2216E Agar 用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 2216E瓊脂
250 BPLS Agar 用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法) BPLS瓊脂
250 BPLS Agar，Modified 用于各種標(biāo)本中沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn)) 改良BPLS瓊脂
250 M-Broth 用于干燥食品和種子中沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)(MERCK方法) M –肉湯
250 Differentia Clostridial Agar 用于干燥食品的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法) 梭菌鑒別瓊脂(DCA)
250 Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)，用前應(yīng)無(wú)菌加入多粘菌素B（SN標(biāo)準(zhǔn)） 氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)
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