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          技術(shù)文章

          轉(zhuǎn)化細胞復(fù)蘇如何去保存呢?

          閱讀:98          發(fā)布時間:2018-4-3

          1、凍存轉(zhuǎn)化細胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。

          2、解凍后的細胞可直接接種到含*生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng),24小時后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。

          3、如果細胞對冷凍保護劑特別敏感,解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑,然后再接種到含*生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

          如果知道細胞的凍存那么就必定聽說過細胞復(fù)蘇實驗。今日詳談細胞復(fù)蘇,整理實驗保存。實驗步驟一共是五個,保存的方法是三個。下面就來看看為您整理出的實驗步驟與保存方法。

          按照順序來,首先就是實驗步驟,一共是五個:

          1、從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。

          2、從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻。

          3、離心,1000rpm,5min。

          4、棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

          5、轉(zhuǎn)化細胞次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
          HPLC含量測定    洛伐他汀    對照品    100600-200502        100mg
          HPLC含量測定    辛伐他汀    對照品    100601-200502        100mg
          含量測定     厄多司坦    對照品    100602-200301        50mg
          含量測定     萘哌地爾    對照品    100606-200301        50mg
          含量測定    厄貝沙坦    對照品    100607-200301        50mg
          含量測定    奧硝唑    對照品    100608-200301        100mg
          HPLC法含量測定    氯雷他定    對照品    100615-200401        100mg
          HPLC法檢查    3,4,5-*氧基苯甲酸    對照品    100617-200501        50mg
          HPLC法含量測定用    鹽酸吉西他濱    對照品    100622-200401        50mg
          轉(zhuǎn)化細胞

           

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