詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
麥角甾苷規(guī)格:20mg/支;98%
人血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Heller MediumBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口
人胚肺成纖維細(xì)胞英文名稱:KMB17
YT肉湯/YT BrothBR250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人惡性黑色素瘤細(xì)胞英文名稱:A375
酵母浸出膏/酵母浸膏/酵母提取物/酵母萃取物/酵母抽提物/水溶性酵母浸膏/Yeast extractBR500克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
七葉苷發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
草魚胚胎細(xì)胞英文名稱:CP-88
亞硫酸鈉瓊脂/Sulfite Agar鼠疫桿菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
新芒果苷 英文名稱 Neomangiferin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
原片堿 英文名稱 Protopine 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
漏蘆(祁州漏蘆) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
反*腺原氨酸 英文名稱 標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 免疫測定用
敵畏 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:62-73-7 #數(shù)字! 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
玫瑰紅鈉對照培養(yǎng)基 英文名稱 培養(yǎng)基適應(yīng)性 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
箭根薯 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
葛根*英文名稱 Puerarin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
蓽澄茄 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
酒石酸長春質(zhì)堿 英文名稱 Catharanthine Tartrate 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
強力霉*鹽(脫氧土霉*)標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 24390-14-5 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: