詳細介紹
里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
CHO(倉鼠卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
Flag標簽蛋白裂解液20 ug20μg、100μg
小鼠視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基100mL
BC-020(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基100mL
L-Glutamine (100X)規(guī)格:100ml
人胎盤羊膜細胞*培養(yǎng)基100mL
MCPC培養(yǎng)基/MCPC Medium弧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人卵巢細胞英文名稱:COC1
醋酸鹽瓊脂/乙酸鹽瓊脂/Acetate Agar細菌醋酸鹽試驗250克國產(chǎn)/進口
牛腎細胞英文名稱:MDBK (NBL-1)
里氏立克次氏體PCR檢測試劑盒品牌鹽酸帕羅西汀 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 含量測定(HPLC)
檳榔 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
西貝母堿 英文名稱 西貝素;西貝堿 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: Sipeimine
鹽酸多奈齊 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
船形烏頭 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
8-O-乙酰山梔苷甲酯 英文名稱 8-O-acetylshanzhiside methyl ester 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 97%
野黃芩苷(燈盞花乙素) 英文名稱 Scutellarin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
川西獐牙菜 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
醋酸鈉 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: HPLC法含量測定
紅景天苷 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
毒靈 英文名稱 Bufalin 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。