使用方法:
收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。 2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 3. 細(xì)胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。 |
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品介紹:
名稱 大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞 2.組織來源:外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?,因此得以分離出不同的細(xì)胞。 5.方法簡介: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R183 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞特點(diǎn)及處理:
產(chǎn)品特點(diǎn): 1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。 4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細(xì)胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲(chǔ)存后對細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細(xì)胞濃度不要太高,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,依細(xì)胞種類而異。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時(shí),亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗。 |
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD1B & B2M Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD1D & B2M Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 FGFR3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells Transfected Lysate (positive control) (denatured)
大鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞三氧化鉬 SP,99.0%異酸 98%iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白
三氧化鉬 99.95%,100nmS-(-)-啉-2-羧酸 99%OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白
鉬酸 AR,85.0%(2S,3aS,7aS)-2-羧酸八氫 98%MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1
鉬酸 99.95% metals basis2-甲酸 97%ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)素
二硫化鉬 99.5% metals basis,18000目甲基烯酸鈉 99%HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組
鉬酸鈉 AR,99.0%苯氧乙酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素
鉬酸鈉 GR苯氧乙酸 98%ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性B
鉬酸鈉 99.99% metal basis CP,98.0%(劇品)OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨谷蛋白