 |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
|
—— 銷售熱線 ——
18321818584 |
| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 14:01:06瀏覽次數(shù)：212
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1201 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1201 |
商品介紹：
名稱 乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：乳腺癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織；女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的，乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性，男性僅占1%。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性，細(xì)胞之間連接松散，容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落，游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉(zhuǎn)移，危及生命。目前，乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞采用胰-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H171 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RIPK1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SETD7 / SET7 / 9 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
VEGFA 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
VEGFA 轉(zhuǎn)錄變體4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
IL2RG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
INHBA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TRAILR1 / TNFRSF10A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
BACE1 轉(zhuǎn)錄變體a 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞兔子可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體Anti-MyD88 Antibody人胃泌素抑制肽（GIP）elisa定量檢測試劑盒
兔脂蛋白αAnti-MYH14 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白23B（MMP23B）elisa定量檢測試劑盒
小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-MYH11 Antibody人角蛋白21-1片段（CYFRA21-1）elisa定量檢測試劑盒
植物鈣調(diào)素Anti-MYH14 Antibody人纖維介素蛋白（FGL2）elisa定量檢測試劑盒
人穿孔素/成孔蛋白Anti-MYL6 Antibody人TERF1相互作用核因子2（TINF2）elisa定量檢測試劑盒
大鼠膽固Anti-MYH4 Antibody人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物（GTEAGE）elisa定量檢測試劑盒
人多效生長因子Anti-MYL7 Antibody人纖α（FGα）elisa定量檢測試劑盒
兔載脂蛋白EAnti-MYL9 Antibody人?；囸I素（A-GHRL） elisa定量檢測試劑盒
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)